NLRPpAb de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9C000

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NLRP1

• O NLRP1 (proteína contendo domínios NACHT, LRR e PYD 1) é uma proteína multidomínio também conhecida como CARD7, DEFCAP, NAC e NALP1. Serve como componente sensor do inflmamassoma NLRP1, um complexo supramolecular que se monta no citosol em resposta a sinais associados a patógenos e medeia a piroptose e a liberação de citocinas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:22801494, PMID:33852854, PMID:35594856
• Após a ativação, o NLRP1 recruta a pro-caspase-1 (proCASP1) através do adaptador PYCARD/ASC, desencadeando a autoproclivagem da CASP1. A CASP1 ativa cliva pro-IL1B, pro-IL18 e gasdermina-D (GSDMD), levando à secreção de citocinas e à morte celular piroptótica. Em contextos deficientes em GSDMD, os inflmamassomas NLRP1 podem engajar a CASP8 e a gasdermina-E (GSDME). Referências relacionadas: PMID:12191486, PMID:17349957, PMID:22665479, PMID:33852854, PMID:35594856
• O NLRP1 detecta diversos sinais associados a patógenos e a danos: as proteases 3C do rinovírus humano clivam o NLRP1 para ativá-lo; o RNA de fita dupla longa (dsRNA) atua como um sensor direto; a irradiação UV-B induz colisões de ribossomos que ativam o NLRP1 via fosforilação da MAP3K20; e o inibidor da dipeptidil peptidase Val-boroPro também desencadeia o inflmamassoma. Referências relacionadas: PMID:33093214, PMID:33243852, PMID:35857590
• O NLRP1 é processado constitutivamente dentro do seu domínio FIIND, gerando fragmentos N- e C-terminais associados de forma não covalente que mantêm um estado autoinibido. Sinais derivados de patógenos ou danos induzem a ubiquitinação e degradação proteassomal do fragmento N-terminal, libertando o fragmento C-terminal para oligomerizar e nuclear a formação do inflmamassoma. Referências relacionadas: PMID:33093214, PMID:33731929, PMID:33731932
• A expressão tecidual é ampla, com níveis elevados em células imunes primárias (neutrófilos, monócitos/macrófagos, células dendríticas, linfócitos) e em epitélios glandulares dos tratos gastrointestinal, respiratório e reprodutivo. Também é detetado na pele (queratinócitos, fibroblastos, folículos pilosos), neurónios do cérebro e células germinativas testiculares. Referências relacionadas: PMID:11113115, PMID:17164409, PMID:15285719, PMID:23349227, PMID:27662089
• A nível subcelular, o NLRP1 localiza-se no citoplasma, citosol e núcleo, e é recrutado para o complexo do inflmamassoma após ativação. Liga ATP e exibe atividade ATPase, que pode ser necessária para a sua função. Referências relacionadas: PMID:11113115, PMID:15212762, PMID:33243852
• Os papéis biológicos chave incluem imunidade inata, resposta inflamatória, defesa antiviral e interação hospedeiro-vírus. Mutações no NLRP1 estão associadas a doenças autoinflamatórias e displasia ectodérmica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o NLRP1 tem um peso molecular previsto de ~166 kDa. Utilize um gel de poliacrilamida de baixa percentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência húmida prolongados (durante a noite em baixa voltagem) para garantir uma transferência eficiente desta grande proteína. Inclua um marcador pré-colorido de alto peso molecular como referência.
• Para IHC-P, recomenda-se a recuperação de antigénio (tampão de citrato ou EDTA, induzida por calor). Valide o anticorpo no seu tecido de interesse (humano, camundongo ou rato) com controlos positivos e negativos apropriados, e titule para minimizar o fundo.
• Para IF/ICC, otimize a fixação (por exemplo, 4% PFA) e a permeabilização (por exemplo, 0,1% Triton X-100) para permitir o acesso ao antigénio predominantemente citoplasmático/nuclear. A coloração simultânea com marcadores de organelos pode ajudar a confirmar a localização.
• Como um anticorpo policlonal, cada lote pode apresentar variações ligeiras; recomendamos experiências piloto para estabelecer as diluições de trabalho ideais para o seu ensaio e sistema de amostra específicos.

CamelBio: A Sua Ponte de Abastecimento Tudo-em-Um

A CamelBio simplifica a aquisição de matérias-primas para IVD, oferecendo anticorpos validados, pares de anticorpos e reagentes auxiliares sob o mesmo teto. Este anticorpo policlonal de coelho NLRP1 apoia a investigação da imunidade inata e do inflmamassoma, e podemos ajudar com o abastecimento personalizado de alvos raros, encomendas em volume e consulta técnica para acelerar o seu desenvolvimento de diagnóstico. O nosso compromisso é fazer a ponte na sua viagem do conceito à clínica com materiais fiáveis e prontos para investigação.