pAb de coelho contra YAP1-S127 não fosforilado para WB, IHC-P, ELISA - P46937

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da YAP1

• O coativador transcricional YAP1 (proteína associada a Yes, YAP65) é o efetor downstream principal da cascata de quinase Hippo (STK3/4–LATS1/2), que restringe a proliferação e promove a apoptose, controlando assim o tamanho dos órgãos e suprimindo tumores. (PubMed:17974916, PubMed:18280240, PubMed:18579750) Referências relacionadas: PMID:17974916 PMID:18280240 PMID:18579750
• A fosforilação mediada por LATS1/2 em Ser127 resulta na retenção citoplasmática e inativação da proteína; a forma não fosforilada se transloca para o núcleo e, em complexo com os fatores de transcrição TEAD, induz a expressão de genes que suportam o crescimento celular, a sobrevivência independente de ancoragem e a transição epitelial-mesenquimal (EMT). (PubMed:18158288, PubMed:26598551, PubMed:34404733) Referências relacionadas: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• Além da via Hippo, YAP1 controla a actomiosina cortical e a arquitetura 3D do tecido ao induzir ARHGAP18 para suprimir a polimerização de F-actina. (PubMed:25778702) Referências relacionadas: PMID:25778702
• YAP1 atua como um corepressor transcricional para TEAD4 nos promotores de AURKA e PLK1, inibindo assim a ciliogênese. (PubMed:25849865) Referências relacionadas: PMID:25849865
• Na sinalização de receptores esteroides, YAP1 age em sinergia com WBP2 para aumentar a atividade do receptor de progesterona (PGR) e pode transativar o fragmento citoplasmático de ERBB4 (isoforma 3 CTF). (PubMed:16772533) Referências relacionadas: PMID:16772533
• YAP1 trafega entre o citoplasma, o núcleo, as junções apertadas e a membrana plasmática; sua localização subcelular determina suas funções oncogênicas ou supressoras de tumor.
• Clinicamente, a expressão de YAP1 está elevada em subconjuntos de câncer de fígado e próstata; na doença de Huntington, uma isoforma sem o domínio de transativação se acumula nos neurônios estriados (em nível de proteína).
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (múltiplos resíduos), ubiquitinação e potencialmente acetilação; é classificada como proto-oncogene e membro do proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (resíduos 50–150) abrange o sítio de fosforilação de LATS1/2 (Ser127); portanto, o anticorpo reconhece especificamente a forma não fosforilada e ativa da proteína. Recomenda-se a inclusão de inibidores de fosfatase durante a lise para preservar o sinal.
• Para western blot, espera-se uma banda principal de ~54 kDa. Bandas adicionais podem aparecer devido a splicing alternativo ou modificações pós-traducionais; valide usando knockdown por siRNA ou bloqueio com peptídeo.
• Na imunohistoquímica (IHC‑P), a coloração nuclear indica YAP1 ativo; a coloração citoplasmática/de membrana deve ser interpretada com cautela. Considere as condições de recuperação de antígeno e inclua um controle de peptídeo bloqueador não fosforilado.
• Para ELISA, use o peptídeo imunizante para confirmar a especificidade; a reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos comparativos entre espécies.

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