Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-NPY para Western Blot, Imunofluorescência, Imunohistoquímica, ELISA - P01303

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NPY

• O Neuropeptídeo Y (NPY), também conhecido como PYY4, é um peptídeo de 36 aminoácidos da família dos polipeptídeos pancreáticos, codificado pelo gene NPY (GeneID: 4852). É um dos neuropeptídeos mais abundantes e amplamente distribuídos no sistema nervoso dos mamíferos.
• O NPY atua como um ligante de alta afinidade para os receptores acoplados à proteína G NPY1R e NPY2R, desencadeando a inibição da adenilato ciclase e um aumento nos níveis intracelulares de Ca²⁺ (PubMed:1321422, PubMed:7592910, PubMed:35165283, PubMed:38882210). Referências relacionadas: PMID:1321422 PMID:7592910 PMID:35165283 PMID:38882210
• Por meio dessa sinalização, o NPY estimula centralmente a ingestão de alimentos e regula a homeostase energética, e perifericamente modula a secreção de íons no cólon e a contratilidade do músculo liso.
• O NPY está predominantemente localizado em vesículas secretoras, especialmente vesículas densas grandes em neurônios, e é liberado após estímulo para atuar como neuromodulador e hormônio. Também é encontrado em células cromafins da medula adrenal.
• A pré-pró-proteína NPY sofre clivagem proteolítica em sítios dibásicos e amidação C-terminal para gerar o peptídeo maduro e biologicamente ativo.
• Palavras-chave para NPY incluem neuropeptídeo, amidação, clivagem em par de resíduos básicos, fosfoproteína, vesícula citoplasmática e secretado, refletindo suas vias de síntese, processamento e liberação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético derivado do NPY humano, portanto, é provável que o anticorpo reconheça um epítopo linear. Espera-se que tenha bom desempenho em aplicações desnaturantes, como Western blotting.
• Para WB, use lisados de cérebro, hipotálamo ou intestino. O NPY é um peptídeo pequeno (aproximadamente 11 kDa); certifique-se de usar géis de baixa porcentagem ou gradiente e padrões de proteína apropriados. Considere adicionar inibidores de protease para evitar degradação.
• Para imunofluorescência (IF) e imunohistoquímica (IHC), a recuperação antigênica pode melhorar o sinal. Métodos de fixação (por exemplo, PFA 4%) são compatíveis, mas valide em seu tecido específico, pois o NPY é um peptídeo secretado e rapidamente degradado.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção, mas o pareamento com outro anticorpo anti-NPY para ELISA sanduíche requer otimização empírica.

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