pAb de coelho contra p38 MAPK - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK

• p38 MAPK (Proteína quinase ativada por mitógeno 14, MAPK14) é uma serina/treonina quinase e componente central da via de transdução de sinal da quinase p38 MAPK, ativada por citocinas pró-inflamatórias e diversos estímulos de estresse para regular as respostas celulares.
• Após a ativação, MAPK14 fosforila as quinases downstream RPS6KA5/MSK1 e RPS6KA4/MSK2, que fosforilam diretamente fatores de transcrição (CREB1, ATF1, NF-kappa-B, STAT1/3) e a histona H3, promovendo remodelação da cromatina e expressão de genes de resposta imediata. Referências relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677
• MAPK14 controla a expressão gênica pós-transcricional via MAPKAPK2/MK2, MAPKAPK3/MK3 e MKNK1/2. MKNK1 e MKNK2 regulam a síntese proteica fosforilando o fator de iniciação EIF4E2. Referências relacionadas: PMID:11154262
• A quinase interage com a caseína quinase II, levando à sua autofosforilação e subsequente fosforilação de TP53/p53. No citoplasma, regula a renovação proteica mediando a degradação de CFLAR dependente de proteassoma e fosforilando a ubiquitina ligase SIAH2. Referências relacionadas: PMID:10747897 PMID:17003045
• MAPK14 modula a endocitose: a internalização de EGFR mediada por clatrina depende da sua fosforilação de EGFR e efetores RAB5A. Também regula a autofagia interferindo no tráfego de ATG9 e controla a clivagem do ectodomínio fosforilando ADAM17, que ativa a sinalização por EGFR. Referências relacionadas: PMID:16932740 PMID:19893488 PMID:20188673
• A via da p38 MAPK é essencial para a parada do ciclo celular induzida por estresse; MAPK14 fosforila CDC25B e CDC25C, facilitando a ligação a 14-3-3 e o atraso da fase G2 após radiação UV. Após dano ao DNA, fosforila TIAR para evitar a degradação do RNAm de GADD45A. Referências relacionadas: PMID:11333986 PMID:20932473
• MAPK14 é predominantemente citoplasmática, mas se transloca para o núcleo após ativação. É modificada por múltiplos eventos pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e conjugação de ubiquitina, que ajustam sua atividade e interações.
• O splicing alternativo gera as isoformas MXI2 e EXIP. MXI2 é ativada por mitógenos e estresse oxidativo, mas fosforila ATF2 de forma pouco eficiente; EXIP pode desempenhar um papel na apoptose inicial. A p38 alfa é amplamente expressa no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético, com níveis menores em pulmão, fígado e rim. MAPK14 também é um alvo de fatores de virulência microbianos; o EsxA de M.tuberculosis fosforila e inibe a produção de IFN-gama em células T. Referências relacionadas: PMID:21586573

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência entre os aminoácidos 261-360 da p38 MAPK humana. A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, verifique a especificidade no seu próprio sistema experimental.
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 41 kDa; uma banda em torno desse tamanho é esperada no Western blotting. Bandas adicionais podem representar isoformas ou formas modificadas pós-traducionalmente.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere otimizar a recuperação de antígenos e a diluição do anticorpo primário de acordo com o seu tipo de tecido.
• Em imunofluorescência/ICC, a permeabilização adequada é recomendada, pois a p38 MAPK se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo.
• Ao usar este anticorpo em ELISA ou outras aplicações, inclua controles positivos e negativos adequados para confirmar o desempenho.

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