Anticorpo Policlonado Pan-Akt de Coelho para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749/P31751/Q9Y243

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de Pan-Akt (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 é uma proteína quinase serina/treonina pertencente à família das quinases AKT (que inclui AKT1, AKT2, AKT3) que regula o metabolismo, a proliferação, a sobrevivência celular, o crescimento e a angiogênese. Referências relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Ela medeia a captação de glicose induzida por insulina via translocação de SLC2A4/GLUT4 e regula a síntese de glicogênio ao inibir GSK3A e GSK3B.
• AKT1 promove a sobrevivência celular através da fosforilação de MAP3K5/ASK1 em 'Ser-83', inibindo a apoptose induzida por estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:11154276
• Ela ativa a sinalização de mTORC1 ao fosforilar TSC2, levando à síntese proteica e ao crescimento celular. Referências relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fosforila os fatores de transcrição FOXO (FOXO1, FOXO3, FOXO4), resultando na retenção citoplasmática e na inibição de suas funções pró-apoptóticas. Referências relacionadas: PMID:10358075
• Ela regula positivamente a transcrição dependente de NF-kappa-B e a atividade de CREB1, aumentando a expressão de genes de sobrevivência celular (por exemplo, BCL2, MCL1). Referências relacionadas: PMID:9829964
• Subcelularmente, AKT1 se localiza no citoplasma, núcleo, membrana celular e espaço intermembranar mitocondrial, refletindo seus diversos papéis na sinalização celular.
• As modificações pós-traducionais chave incluem fosforilação (ativação), acetilação, glicosilação e ubiquitinação, conforme destacado pelas palavras-chave do UniProt.
• AKT1 é expressa de forma ubíqua nos tecidos humanos, com níveis elevados em cânceres de próstata e mama, particularmente a forma fosforilada de Tyr-176 durante a progressão do câncer de mama.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange uma região conservada (aa 311-480) de AKT1, AKT2 e AKT3 humanos, o que prevê uma ampla reatividade pan-Akt em toda a família AKT.
• Para western blotting, considere as múltiplas bandas correspondentes às isoformas de AKT: ~48 kDa (AKT1), ~55 kDa (AKT2) e ~51/54 kDa (AKT3). Valide a especificidade da banda usando controles específicos para isoformas ou knockdown por siRNA.
• Para imunofluorescência/imuno-histoquímica, a fixação com metanol ou formaldeído geralmente é adequada; no entanto, a permeabilização pode ser necessária para alvos intracelulares.
• Como um anticorpo policlonado, é esperada variabilidade entre lotes no título e na afinidade; é aconselhável titular o anticorpo para cada novo lote e aplicação.
• Na imunoprecipitação, use esferas de proteína A/G para uma captura ideal de IgG de coelho.
• Aplicações de ELISA podem exigir um tampão de revestimento e um sistema de detecção otimizados; teste múltiplas concentrações para maximizar a relação sinal-ruído.

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