Anticorpo Monoclonal Anti-MHC de Classe II de Camundongo (I-A/I-E) Conjugado com PE para Citometria de Fluxo - P18468 / P06342 / Q3U060 / P14435

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MHC de Classe II (I-A/I-E)

• As cadeias beta I-A e I-E são componentes centrais das moléculas de complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe II de camundongo, codificadas por genes como H2-Ab1 e H2-Eb1, respectivamente. Essas proteínas são fundamentais para a imunidade adaptativa, apresentando peptídeos antigênicos às células T auxiliares CD4+.
• Cada heterodímero de MHC de classe II consiste em uma cadeia alfa e uma cadeia beta; este anticorpo reconhece as cadeias beta de ambos os isotipos I-A e I-E, permitindo a ampla detecção da expressão de MHC de classe II.
• Em nível subcelular, as cadeias beta de MHC de classe II são proteínas de membrana do tipo I de passagem única que circulam entre a membrana plasmática e os compartimentos endossomais, onde ocorre o carregamento de peptídeos antes do tráfego para a superfície celular.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem a formação de ligações dissulfeto no domínio extracelular, glicosilação N-ligada e ubiquitinação, que regulam a estabilidade da proteína e a renovação do MHC II.
• As moléculas são classificadas dentro da superfamília das imunoglobulinas e possuem uma estrutura característica: um peptídeo sinal, dois domínios extracelulares (α1/β1 e α2/β2), uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática curta.
• Como mediadores centrais da sinapse imune adaptativa, as moléculas de MHC de classe II fazem a ponte entre os sistemas inato e adaptativo, garantindo a ativação específica de células T e a vigilância imunológica.
• A expressão tecidual é predominante em células apresentadoras de antígenos profissionais (células dendríticas, macrófagos, células B) e células epiteliais tímicas, mas pode ser induzida em outros tipos celulares por estímulos inflamatórios.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange sequências I-A/I-E; para projetos de reagentes semelhantes, construtos de comprimento total ou de domínio extracelular podem ajudar a preservar o reconhecimento da conformação nativa.
• Este anticorpo conjugado com PE é destinado à citometria de fluxo. Titule o anticorpo em seu sistema celular relevante e inclua um controle de isotipo adequado e uma etapa de bloqueio de receptores Fc para minimizar o fundo.
• O anticorpo exibe reatividade cruzada com camundongos; a validação é recomendada se amostras de outras espécies de roedores forem testadas.
• Os pesos moleculares previstos das cadeias beta alvo variam de 26 kDa a 32 kDa. Note que o anticorpo não foi validado para western blot desnaturante; se tentado, a otimização em condições nativas ou não redutoras pode ser necessária.
• Como o anticorpo reconhece múltiplas variantes da cadeia beta, ele serve como uma ferramenta pan-MHC de classe II. Verifique os padrões de expressão na linhagem específica de camundongo ou linha celular a ser utilizada.

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