Anticorpo Monoclonal de Rato Anti-CD3 Humano Conjugado a PE para Citometria de Fluxo - P07766

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD3E

• O CD3E codifica a cadeia épsilon da glicoproteína de superfície das células T CD3, que forma o complexo TCR-CD3 nos linfócitos T e desempenha um papel essencial na resposta imunitária adaptativa. Referências relacionadas: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Após o reconhecimento pelo TCR, a cadeia épsilon do CD3 transmite sinais de ativação através da membrana celular via motivos de ativação baseados em tirosina do imunorrecetor (ITAMs) que são fosforilados pelas quinases da família Src LCK e FYN. Referências relacionadas: PMID:2470098 PMID:40592325
• Os ITAMs fosforilados servem como locais de ancoragem para a quinase ZAP70, levando à sua ativação e ao início de cascatas de sinalização a jusante críticas para a ativação e desenvolvimento das células T.
• O CD3E regula a expressão superficial do complexo TCR-CD3, mediando a internalização e a redução através de sequências de endocitose na sua região citosólica. Referências relacionadas: PMID:10384095 PMID:26507128
• Além disso, o CD3E atua como um recetor para o ITPRIPL1, que inibe a ativação das células T ao recrutar NCK1 e bloquear a interação CD3E-ZAP70, suprimindo assim a sinalização ERK-NFkB e o influxo de cálcio. Referências relacionadas: PMID:12110186 PMID:38614099
• A proteína contém um domínio semelhante à imunoglobulina, uma hélice transmembranar e ligações dissulfeto, consistente com o seu papel como recetor de membrana celular (Palavras-chave UniProt: Ligação dissulfeto, Domínio de imunoglobulina, Transmembranar).
• A localização subcelular é principalmente na membrana celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo está diretamente conjugado a PE, evite ciclos de congelação-descongelação e armazene protegido da luz para manter a estabilidade do fluoróforo.
• Realize titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para coloração em citometria de fluxo, minimizando a ligação inespecífica e maximizando a relação sinal-ruído.
• Inclua controlos de isotipo apropriados e controlos de compensação ao desenhar painéis de citometria de fluxo multicolor que incluam PE.
• O CD3 é expresso em linfócitos T maduros; portanto, utilize PBMCs, sangue total ou linhas celulares de células T como amostras de controlo positivo.
• Valide a coloração no sistema biológico relevante e confirme a especificidade do alvo utilizando controlos de nocaute ou de silenciamento, sempre que possível.

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