Anticorpo monoclonal de coelho anti-humano Calreticulina conjugado a PE para citometria de fluxo intracelular - P27797

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Calreticulina

• A Calreticulina (CALR, também conhecida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP, grp60) é uma chaperona de ligação ao cálcio altamente conservada, localizada principalmente no lúmen do retículo endoplasmático (RE).
• Ela atua como um componente central do ciclo calreticulina/calnexina, promovendo o dobramento, a montagem oligomérica e o controle de qualidade de glicoproteínas recém-sintetizadas por meio da ligação a glicanos N-ligados monoglicosilados (PubMed:7876246). Referências relacionadas: PMID:7876246
• A Calreticulina interage com o domínio de ligação ao DNA do receptor de glicocorticoides (NR3C1) e medeia sua exportação nuclear, conectando assim a função do RE às vias de sinalização citoplasmáticas (PubMed:11149926). Referências relacionadas: PMID:11149926
• Além do RE, a calreticulina está localizada no citosol, na superfície celular, na matriz extracelular e nas vesículas secretoras; ela também é detectada no retículo sarcoplasmático, nos grânulos corticais e nos grânulos citolíticos, refletindo suas funções multifuncionais.
• Ela participa da homeostase do cálcio, da adesão celular e da regulação da expressão gênica, além de estar implicada na maturação dos oócitos e no bloqueio da poliespermia.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, hidroxilação e uma ligação dissulfeto conservada; a proteína tem peso molecular de aproximadamente 48 kDa e contém um peptídeo-sinal, domínios de ligação a lectinas e sítios de ligação a metais.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 335–417) da calreticulina humana; verifique se esse epítopo está acessível em seu protocolo específico de fixação e permeabilização para citometria de fluxo intracelular.
• Como este anticorpo é conjugado a PE e recomendado para marcação intracelular, considere otimizar as condições de permeabilização e incluir controles de isotipo apropriados para levar em conta um possível sinal de fundo causado por receptores Fc intracelulares ou ligação inespecífica.
• A Calreticulina é expressa em vários compartimentos subcelulares; valide a especificidade da marcação comparando os padrões de localização no RE, no citosol ou na superfície celular, dependendo do contexto experimental.
• Para aplicações diferentes da citometria de fluxo intracelular, recomenda-se fortemente realizar testes preliminares, pois este anticorpo foi validado apenas para a aplicação declarada nas condições do fornecedor.

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