Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano CD117/c-Kit conjugado com PE para Citometria de Fluxo - P10721

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD117/c-Kit

• O CD117, também conhecido como c-Kit, SCFR ou PBT, é um recetor transmembrana de tirosina-cinase proteica codificado pelo gene KIT; o splicing alternativo produz múltiplas isoformas (UniProt: P10721).
• O principal ligando é o fator de células estaminais (SCF/KITLG). A ligação do ligando induz a dimerização do recetor e a autofosforilação, ativando cascatas de sinalização a jusante que regulam a sobrevivência, proliferação e diferenciação celular na hematopoiese, melanogénese, gametogénese e desenvolvimento de mastócitos.
• O CD117 ativado recruta e fosforila proteínas adaptadoras e enzimas chave, incluindo PIK3R1 (PI3K), GRB2 e PLCG1, levando à ativação das vias AKT, RAS/MAPK e STAT (STAT1, STAT3, STAT5), bem como à produção de segundos mensageiros DAG e IP3.
• O CD117 localiza-se predominantemente na membrana celular, mas também pode ser encontrado no citoplasma após internalização e tráfego.
• No testículo, o CD117 é detetado em espermatogónias na camada basal e em células intersticiais de Leydig, e a sua expressão é mantida em espermatozoides ejaculados (ao nível proteico). Referências relacionadas: PMID:20601678
• A proteína é fortemente glicosilada, contém domínios imunoglobulínicos extracelulares e um domínio cinase intracelular, e é classificada como um proto-oncogene; as pontes dissulfeto e a fosforilação são características estruturais e funcionais chave.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo está conjugado diretamente com PE, tornando-o adequado para a deteção em citometria de fluxo em uma única etapa do CD117, sem a necessidade de um anticorpo secundário.
• O imunogénio corresponde à região extracelular (aa 26–520) do CD117 humano, sugerindo reatividade com o recetor de superfície nativo.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo celular e instrumento específicos; inclua controlos de isótipo apropriados e passos de bloqueio de recetores Fc para minimizar a ligação não específica.
• Valide a expressão em linhagens de células humanas conhecidas por serem CD117-positivas (por exemplo, TF-1, HMC-1) ou em células hematopoiéticas primárias.
• Dado que o CD117 pode ser internalizado após estimulação pelo ligando, considere o momento da fixação e coloração ao analisar células ativadas.

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