Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Humano CD140b/PDGFRβ para Citometria de Fluxo - P09619

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD140b/PDGFRβ

• O receptor beta do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGFRB, CD140b) é um receptor de tirosina quinase de superfície celular codificado pelo gene PDGFRB (ID do gene: 5159). Ele se liga a PDGFB e PDGFD homodiméricos, bem como a heterodímeros PDGFA/PDGFB, iniciando cascatas de sinalização que regulam o desenvolvimento embrionário, a proliferação celular, a sobrevivência, a diferenciação, a quimiotaxia e a migração.
• O PDGFRB é crucial para o desenvolvimento vascular, promovendo o recrutamento de pericitos e células de músculo liso às células endoteliais. Contribui para a formação de neointima nos locais de lesão vascular e é necessário para o desenvolvimento normal do sistema cardiovascular.
• No rim, a sinalização do PDGFRB é essencial para o recrutamento de células mesangiais e a formação de uma rede capilar ramificada nos glomérulos, destacando seu papel na vascularização específica de órgãos.
• A ligação do ligante desencadeia a autofosforilação e a ativação de vias de sinalização downstream, incluindo PLCG1/PKC, PI3K/AKT1 e RAS/RAF/MAPK (ERK1/2). Também fosforila cinases da família SRC e proteínas adaptadoras como SHC1, GRB2, CBL e NCK1, levando ao rearranjo do citoesqueleto de actina e à formação de rugas na membrana.
• O receptor está localizado na membrana celular, mas após a ativação, é internalizado em vesículas citoplasmáticas e transportado para o lisossomo para desregulação. Esse tráfego subcelular dinâmico modula a duração e a intensidade do sinal.
• O PDGFRB é um membro da família das receptor tirosina quinases do tipo III e compartilha domínios estruturais, incluindo cinco domínios extracelulares semelhantes a imunoglobulinas, uma única hélice transmembranar e um domínio quinase intracelular dividido. Pode formar heterodímeros com PDGFRA, o que diversifica o reconhecimento de ligantes e a saída de sinalização.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada, formação de pontes dissulfeto e ubiquitinação. A fosforilação em vários resíduos de tirosina cria locais de ancoragem para proteínas contendo domínio SH2, uma marca característica da transdução de sinal.
• Clinicamente, o PDGFRB é classificado como um proto-oncogene; mutações, superexpressão ou rearranjos cromossômicos estão associados a várias malignidades e distúrbios genéticos (por exemplo, miofibromatose infantil, síndrome de Penttinen). Isso o torna um biomarcador valioso e um alvo terapêutico em oncologia.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho conjugado com PE foi desenvolvido para análise direta por citometria de fluxo de CD140b/PDGFRβ de superfície em células humanas vivas não fixadas. É recomendado um controle de isotipo correspondente para avaliar a ligação inespecífica.
• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aminoácidos 33–530), garantindo o reconhecimento do receptor nativo de superfície. Para uma coloração ideal, titule o anticorpo para determinar a concentração de saturação para o seu tipo de célula e evite a coloração excessiva.
• Se a detecção intracelular for necessária, a fixação e a permeabilização podem alterar a acessibilidade do epítopo; valide a coloração sob condições apropriadas. O fragmento de imunógeno recombinante de 37 kDa pode servir como controle positivo para ensaios de Western blot ou ELISA, se necessário.
• Note que o PDGFRB é expresso em várias células mesenquimais, células de músculo liso vascular, pericitos e certas linhas de células tumorais. Inclua controles biológicos relevantes (por exemplo, linhas de células positivas e negativas para PDGFRB) no seu painel de citometria de fluxo.

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