mAb PE coelho anti-Humano CD170/Siglec-5 – O15389

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CD170/Siglec-5

• O gene SIGLEC5 codifica a lectina 5 semelhante à imunoglobulina ligante de ácido siálico, também conhecida como CD170, antígeno CD33 tipo 2 (CD33L2) e proteína ligante de obesidade 2 (OB-BP2).
• Ele funciona como uma molécula de adesão putativa que medeia a ligação dependente de ácido siálico às células, reconhecendo ácidos siálicos ligados em alfa-2,3 e alfa-2,6 com igual afinidade.
• O sítio de reconhecimento do ácido siálico pode ser mascarado por interações cis com ácidos siálicos na mesma superfície celular, potencialmente regulando sua função adesiva.
• SIGLEC5 é um membro da família das lectinas semelhantes à imunoglobulina ligantes de ácido siálico (SIGLEC), caracterizada por um domínio Ig de conjunto N-terminal e múltiplos domínios Ig de conjunto C2.
• Subcelularmente, é uma proteína transmembranar com peptídeo sinal, região extracelular, hélice transmembranar e cauda citoplasmática.
• As modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto e glicosilação N-ligada, típicas de receptores de superfície celular.
• Especificidade tecidual: Expresso por células da linhagem monocítica/mieloide, com níveis elevados em leucócitos do sangue periférico, baço e medula óssea, e níveis mais baixos em linfonodo, pulmão, apêndice, placenta, pâncreas e timo. Está presente em monócitos e neutrófilos, mas ausente em linhas de células leucêmicas em estágio inicial.
• A proteína madura tem peso molecular previsto de aproximadamente 61 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é diretamente conjugado a PE, permitindo uso imediato em citometria de fluxo sem uma etapa de detecção secundária. Garanta controles de compensação adequados ao usar múltiplos fluoróforos.
• O imunógeno corresponde à região extracelular (aminoácidos 17-434), direcionado ao domínio de ligação do ácido siálico. Espera-se que esta região esteja acessível em células vivas não permeabilizadas.
• Para citometria de fluxo, valide a coloração em monócitos ou neutrófilos do sangue periférico humano, que expressam CD170/Siglec-5 naturalmente. Considere usar uma linha de células mieloides como controle positivo.
• Como interações cis com ácidos siálicos da superfície celular podem mascarar o epítopo, considere tratar as células com sialidase antes da coloração para desmascarar CD170/Siglec-5, especialmente se forem observados sinais fracos.
• Use um controle de isotipo de coelho conjugado a PE adequado para distinguir a ligação específica do ruído de fundo.
• O anticorpo é validado para reatividade em humanos; a reatividade cruzada com outras espécies não foi confirmada. Teste em amostras da espécie desejada se for utilizado fora de amostras humanas.

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