Anticorpo Monoclonal Coelho anti-CD177 Humano Conjugado a PE para FC - Q8N6Q3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD177

• CD177 (também conhecido como glicoproteína NB1, PRV-1, HNA-2a) é uma glicoproteína de superfície celular ancorada por GPI expressa em um subconjunto de neutrófilos maduros.
• Em associação com o heterodímero de integrina beta-2 ITGAM/CD11b e ITGB2/CD18, o CD177 media a ativação de neutrófilos pré-ativados por TNF, incluindo desgranulação e produção de superóxido. Referências relacionadas: PMID:21193407
• O CD177 impede a internalização da integrina beta-2 e atenua a sinalização de quimiocinas, mudando a resposta do neutrófilo de migração para adesão. Referências relacionadas: PMID:28807980
• Através da interação heterofílica com PECAM1 em células endoteliais, o CD177 facilita a migração transendotelial de neutrófilos in vitro. Referências relacionadas: PMID:17580308
• Apesar de seu papel na migração transendotelial in vitro, o CD177 parece ser dispensável para o recrutamento de neutrófilos durante infecções bacterianas in vivo. Referências relacionadas: PMID:23461681
• O CD177 atua como um receptor para a forma madura da protease PRTN3, exibindo-a na superfície celular do neutrófilo. Referências relacionadas: PMID:17244676 PMID:18462208
• Ao apresentar PRTN3 na superfície do neutrófilo, o CD177 pode aumentar a integridade das junções das células endoteliais durante a diapedese neutrofílica. Referências relacionadas: PMID:23202369
• O CD177 localiza-se na membrana celular, microdomínios de membrana (rafts), vesículas secretoras, membranas de grânulos citoplasmáticos e lamellipodia.
• O CD177 é altamente expresso na medula óssea normal e em granulócitos de pacientes com policitemia vera e trombocitemia essencial. A expressão começa no estágio de metamielócito durante a diferenciação neutrofílica, e a porcentagem de neutrófilos positivos para CD177 varia amplamente entre indivíduos.
• A proteína sofre splicing alternativo e possui uma âncora GPI, e seu peso molecular varia entre as isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é gerado contra um imunógeno que abrange os aminoácidos 22-407, correspondendo ao domínio extracelular do CD177 humano. Esta região está bem exposta em células vivas, tornando o anticorpo adequado para detecção de CD177 de superfície celular por citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo (FC), use controles de isotipo apropriados e faça titulação do anticorpo para determinar as concentrações ótimas de coloração. Inclua uma estratégia de gateamento de neutrófilos (por exemplo, coloração dupla para CD16 e CD66b) para identificar populações que expressam CD177.
• Como o CD177 é expresso apenas em um subconjunto de neutrófilos e os níveis de expressão variam entre indivíduos, considere analisar uma coorte de doadores e relatar a porcentagem de positividade em vez de números absolutos de células.
• A pré-incubação com reagentes bloqueadores de receptores Fc é recomendada para minimizar a ligação inespecífica aos receptores Fcγ nos neutrófilos.
• Este anticorpo conjugado a PE está pronto para uso; evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento e proteja da luz para preservar a fluorescência.
• A reatividade cruzada foi confirmada com amostras humanas. Para uso com outras espécies, valide a ligação e a especificidade de forma independente.

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