Anticorpo Monoclonal Coelho anti-CD24 Humano Conjugado a PE para Citometria de Fluxo - P25063

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD24

• O CD24, também conhecido como Antígeno de Aglomerado 4 de Carcinoma de Células Pequenas do Pulmão, é uma glicoproteína âncora-GPI codificada pelo gene CD24. O splicing alternativo gera múltiplos isoformas.
• Desempenha um papel fundamental na diferenciação celular em vários tipos de células, com sinalização desencadeada pela ligação de ligantes do tipo lectina aos carboidratos do CD24, levando à liberação de segundos mensageiros derivados de sua âncora-GPI.
• Nas células B, o CD24 modula respostas de ativação, promove a proliferação dependente de antígeno e impede a diferenciação terminal em células formadoras de anticorpos. Referências relacionadas: PMID:11313396
• O CD24 associa-se ao SIGLEC10 para suprimir seletivamente as respostas imunes a padrões moleculares associados a danos (DAMPs) como HMGB1, HSP70 e HSP90, indicando um papel no controle da autoimunidade.
• Subcelularmente, o CD24 está localizado na membrana celular, ancorado via uma porção GPI.
• A expressão tecidual ocorre predominantemente em células B, também encontrada em algumas células T, linhas celulares de eritroleucemia e linhas de carcinoma de células pequenas do pulmão, tornando-o um marcador para estágios de desenvolvimento de células B e certos cânceres.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e fixação da âncora-GPI, contribuindo para seu peso molecular variável (~8-13 kDa dependendo da glicosilação e do isoforma).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Sendo um anticorpo conjugado a PE, armazene a 2-8°C protegido da luz e evite ciclos de congelamento-descongelamento para manter o brilho do fluoróforo.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal no seu sistema experimental; uma diluição inicial de 1:50 a 1:200 é comum para conjugados PE, mas a otimização é essencial.
• Inclua controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade para excluir células mortas e ligação inespecífica.
• Valide o anticorpo em uma linha celular de células B humanas relevante (ex.: Raji, Daudi) ou PBMCs para confirmar o padrão esperado de coloração de superfície; uma etapa de bloqueio com soro normal da espécie hospedeira pode reduzir o fundo.
• Considerando que o imunógeno abrange o domínio extracelular N-terminal (aminoácidos 1-80), espera-se que o anticorpo reconheça o epítopo exposto em células vivas; considere os efeitos da fixação/permeabilização se usado em citometria de fluxo intracelular.

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