Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Humano CD361 para FC - P34910

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de EVI2B / CD361

• Codificado pelo gene EVI2B, o CD361 é uma glicoproteína transmembrana também conhecida como homólogo da proteína do sítio 2B de integração viral ecotrópica, com splicing alternativo que gera múltiplas isoformas.
• Desempenha um papel essencial na diferenciação de granulócitos e na funcionalidade de células progenitoras hematopoiéticas, influenciando a progressão do ciclo celular e a sobrevivência.
• Localiza-se na membrana como uma proteína de hélice transmembrana de passagem única, o que é consistente com seu envolvimento em sinalização extracelular ou adesão.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e fosforilação, que podem regular sua estabilidade, localização ou funções de sinalização.
• Classificado como proto-oncogene; sua desregulação está associada a malignidades hematopoiéticas, embora os mecanismos oncogênicos precisos ainda estejam em investigação.
• É amplamente expresso na medula óssea, células mononucleares do sangue periférico, fibroblastos e linhagens linfoblastoides transformadas por EBV; apresenta forte expressão em células granulocíticas e expressão mais fraca em linfócitos.
• Contém um peptídeo sinal para direcionamento à via secretora e apresenta um domínio transmembrano necessário para ancoragem na membrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região extracelular (aminoácidos 22–199) do CD361, tornando este anticorpo adequado para detecção de proteína expressa na superfície em ensaios de citometria de fluxo com células vivas.
• Para FC, recomenda-se realizar a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para seu tipo celular específico e configuração experimental; uma faixa inicial de 0,5–5 µg por milhão de células costuma ser útil para anticorpos conjugados.
• Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante (por exemplo, PBMCs humanas, linhagens de células granulocíticas) e inclua controles adequados, como células não coradas e anticorpos conjugados com PE de isotipo correspondente, para garantir a especificidade.
• Como a expressão de CD361 é mais forte em granulócitos, a pré-marcação com marcadores granulocíticos ou o uso de centrifugação em densidade para enriquecer granulócitos pode melhorar a resolução do sinal.
• As condições de preparação da amostra (por exemplo, fixação, permeabilização) devem ser otimizadas para coloração de superfície se a viabilidade for afetada, embora a coloração de células vivas seja recomendada para este anticorpo direcionado ao domínio extracelular.

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