Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD48 humano conjugado com PE para citometria de fluxo - P09326

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD48

• O CD48, também conhecido como SLAMF2 ou BLAST-1, é uma glicoproteína da superfície celular ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI), pertencente à família das moléculas de ativação linfocitária de sinalização (SLAM). Apresenta uma região extracelular com dois domínios semelhantes a imunoglobulinas e uma âncora GPI, e o splicing alternativo produz múltiplas isoformas.
• O CD48 interage, por meio do seu domínio de imunoglobulina N-terminal, com os recetores da superfície celular CD244/2B4 ou CD2 para regular a função e a ativação das células imunitárias. Referências relacionadas: PMID:12007789, PMID:19494291, PMID:27249817
• Medeia a transdução de sinais nas células T ao associar-se ao CD2 e recrutar eficientemente a proteína-quinase da família Src LCK e a LAT para o complexo TCR/CD3, promovendo assim a fosforilação da LCK. Referências relacionadas: PMID:12007789, PMID:19494291
• Após a ligação ao CD244, o CD48 induz a fosforilação dos motivos de ativação baseados em tirosina do imunorrecetor (ITSMs) no citoplasma do CD244, iniciando eventos de sinalização que conduzem à formação da sinapse imunológica e à libertação direcionada de grânulos citolíticos por linfócitos T e células NK. Referências relacionadas: PMID:27249817
• O CD48 está localizado na membrana celular e nas jangadas de membrana; também existe uma forma secretada, provavelmente resultante da clivagem da âncora GPI ou de splicing alternativo.
• É amplamente expresso em todas as células hematopoiéticas, incluindo linfócitos, monócitos e células dendríticas.
• A proteína contém domínios de imunoglobulina conservados e ligações dissulfureto, estando sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N e ancoragem por GPI.

Orientação experimental e dicas técnicas

• Para aplicações de citometria de fluxo, titule este anticorpo conjugado com PE para determinar a concentração ideal de marcação para o seu tipo celular e condições experimentais.
• Como o CD48 é uma proteína de superfície ancorada por GPI, a marcação da superfície de células vivas é normalmente suficiente; evite a permeabilização, a menos que seja especificamente necessária a deteção intracelular.
• Com base no desenho do imunógeno (domínio extracelular, aminoácidos 27–220), prevê-se que o anticorpo reconheça a conformação nativa do CD48; valide-o no sistema de amostra relevante, como células mononucleares do sangue periférico humano (PBMCs) ou linhagens celulares hematopoiéticas.
• Considere a utilização de uma etapa adequada de bloqueio dos recetores Fc para reduzir a ligação não específica, especialmente ao trabalhar com células mieloides.
• Dada a expressão generalizada do CD48 nas células hematopoiéticas, estabeleça estratégias de gating adequadas e inclua controlos de isotipo para diferenciar a marcação específica.

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