Anticorpo monoclonal PE de coelho anti-CD62E/E-Selectina humana para FC - P16581

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da E-selectina

• A E-selectina, também conhecida como CD62E, molécula de adesão de leucócitos endoteliais 1 (ELAM-1) e molécula de adesão de leucócitos-células endoteliais 2 (LECAM2), é uma glicoproteína da superfície celular codificada pelo gene SELE (GeneID: 6401).
• Esta molécula medeia a adesão dos neutrófilos sanguíneos ao endotélio ativado por citocinas através da interação com SELPLG/PSGL1, desempenhando um papel central na imunoadesão e no recrutamento de leucócitos durante a inflamação.
• A proteína contém um domínio de lectina do tipo C na extremidade N-terminal, um domínio semelhante ao EGF e vários domínios de repetições de consenso curtas (sushi), característicos das selectinas, e necessita de cálcio para exercer a sua função.
• É uma proteína transmembranar localizada na membrana celular, com pontes dissulfureto que estabilizam os seus domínios extracelulares e uma única hélice transmembranar que a ancora à superfície.
• A E-selectina também pode contribuir para a morfogénese capilar, sugerindo funções mais amplas na biologia vascular além do tráfego de células imunitárias.
• A proteína madura tem um peso molecular aproximado de 66 kDa (UniProt: P16581), consistente com a especificação do produto.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 22–230 da E-selectina humana, abrangendo os domínios extracelulares de lectina e semelhantes ao EGF, que são essenciais para a ligação ao ligando; este desenho favorece a especificidade para o recetor nativo.
• Para citometria de fluxo, considere utilizar células endoteliais humanas ativadas (por exemplo, HUVECs estimuladas com TNF-α ou IL-1β) como controlo positivo e valide a especificidade da ligação com péptidos bloqueadores apropriados ou controlos de isotipo.
• O conjugado PE permite uma coloração direta numa única etapa, minimizando o fundo e o tempo do procedimento; titule o anticorpo para otimizar a relação sinal/ruído no seu sistema celular.
• Confirme a expressão do alvo de 66 kDa na sua amostra consultando a entrada SWISS-PROT P16581 e considere realizar uma verificação do peso molecular caso mude para ensaios de western blot.

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