Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Humano CD8 PolymAb® para FC - P01732 / P10966

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD8

• O gene CD8A codifica a glicoproteína de superfície de células T CD8 cadeia alfa, também conhecida como antígeno de diferenciação de linfócitos T T8/Leu-2.
• O CD8 funciona como um coreceptor de glicoproteína integral de membrana para moléculas de MHC de classe I, ligando-se simultaneamente ao receptor de células T (TCR) e ao complexo MHC de classe I:peptídeo nas células apresentadoras de antígeno.
• Ao interagir com o MHC de classe I, o CD8 recruta a quinase Src LCK para o complexo TCR-CD3, iniciando a sinalização intracelular que promove a ativação de linfócitos, a produção de citocinas e as funções efetoras de células T citotóxicas (CTL).
• O CD8A é expresso em células T derivadas do timo principalmente como um heterodímero ligado por dissulfeto com o CD8B, mas também pode formar homodímeros CD8A em subconjuntos de células natural killer (NK), células T de memória, linfócitos intraepiteliais, monócitos e células dendríticas.
• O homodímero CD8A em células NK suporta um mecanismo de sobrevivência que facilita a conjugação e lise de múltiplas células alvo, e também promove a diferenciação de linfócitos ativados em células T de memória CD8.
• O CD8A localiza-se na membrana celular como uma proteína transmembrana do tipo I de passagem única; uma forma secretada também foi identificada.
• Modificações pós-traducionais principais incluem splicing alternativo, formação de ligações dissulfeto, glicosilação N-ligada e palmitoilagem em um resíduo de cisteína próximo à membrana, que são críticas para sua estrutura e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise por citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal para seu sistema experimental específico e tipo de célula.
• Use controles de isotipo apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para avaliar o fundo e definir o gating adequado.
• Proteja o anticorpo conjugado com PE da luz durante o manuseio e armazenamento para evitar o fotobranqueamento.
• Este anticorpo detecta as cadeias CD8A e CD8B; considere sua adequação para identificar subconjuntos de células T CD8+ e outras populações expressoras de CD8, como células NK e células dendríticas em células mononucleares de sangue periférico humano (PBMCs).
• Realize a coloração de superfície em células vivas em condições padrão; evite a fixação antes da coloração, se possível, pois pode ocorrer mascaramento de epítopos.

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