Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD8b humano conjugado a PE para citometria de fluxo - P10966

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da CD8b

• A CD8b, também conhecida como cadeia beta da CD8, é uma glicoproteína de superfície das células T pertencente à superfamília das imunoglobulinas. Ela existe em múltiplas isoformas (isoformas 1, 3, 5, 6, 7 e 8) geradas por splicing alternativo.
• A CD8b forma heterodímeros com a cadeia alfa da CD8 e funciona como correceptor para complexos de MHC de classe I:peptídeo nas células apresentadoras de antígenos.
• Após a ligação ao MHC de classe I, a CD8b recruta a quinase Src LCK para o complexo TCR-CD3, iniciando cascatas de sinalização intracelular que promovem a ativação, a proliferação e a função citotóxica das células T.
• A cauda citoplasmática da CD8b contém um sítio de palmitoilação que direciona a proteína para as jangadas lipídicas, concentrando moléculas de sinalização e aumentando a eficiência da transdução de sinais.
• A CD8b é fundamental para a seleção tímica das células T CD8+, garantindo o desenvolvimento adequado do repertório de linfócitos T citotóxicos.
• Subcelularmente, a CD8b localiza-se principalmente na membrana plasmática, mas isoformas secretadas também foram detectadas.
• A expressão tecidual é restrita ao timo e às células T CD8+ periféricas, com certas isoformas apresentando expressão preferencial em populações tímicas em comparação com as periféricas.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, que podem regular a estabilidade da proteína e as propriedades de interação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno foi desenvolvido contra o domínio extracelular (aa 22-170) da CD8b humana, abrangendo o domínio do tipo imunoglobulina V, fundamental para a interação com o MHC I, o que o torna adequado para a detecção da CD8b expressa na superfície por citometria de fluxo.
• Como este anticorpo é validado para citometria de fluxo, considere utilizá-lo na imunofenotipagem de subpopulações de células T, mas realize experimentos de titulação para determinar a concentração ideal.
• Como o anticorpo é diretamente conjugado a PE (ficoeritrina), certifique-se de utilizar configurações adequadas de compensação em painéis de citometria de fluxo multicolorida, especialmente ao realizar marcação conjunta com FITC ou APC.
• Para outras aplicações, como Western blot ou imuno-histoquímica, o anticorpo pode exigir uma nova validação, pois o conjugado de PE e o reconhecimento do antígeno podem apresentar comportamentos diferentes.
• Utilize controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade nos experimentos de citometria de fluxo para distinguir a marcação específica de CD8b da marcação de fundo.

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