Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Complemento C3 Humano para FC - P01024

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Complemento C3

• C3 é uma proteína precursora de aproximadamente 187 kDa que é clivada pós-tradução em fragmentos funcionais C3a (anafilatoxina) e C3b (opsonina). O fragmento C3b contém uma ligação tioéster reativa que permite a ligação covalente às superfícies de patógenos.
  Referências relacionadas:
  PMID:6903192

• C3b opsoniza patógenos e atua como componente não enzimático da C5 convertase nas vias do complemento clássica e alternativa, sendo fundamental para a fagocitose e a eliminação imunológica.
  Referências relacionadas:
  PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864

• A anafilatoxina C3a medeia a inflamação local ao se ligar ao seu receptor C3AR1, desencadeando a desgranulação de mastócitos e basófilos, liberação de citocinas e sinalização por receptor acoplado à proteína G.
  Referências relacionadas:
  PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423

• C3a também atua como um potente quimioatraente para macrófagos e neutrófilos, direcionando sua migração para os tecidos inflamados.
  Referências relacionadas:
  PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786

• Além da imunidade, C3 (também conhecido como proteína estimuladora da acilação, ASP) funciona como um hormônio adipogênico que estimula a síntese de triglicerídeos e o transporte de glicose em adipócitos através do receptor C5AR2, regulando assim a eliminação pós-prandial de lipídios.
  Referências relacionadas:
  PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750

• C3 é principalmente secretado no plasma e produzido por hepatócitos e adipócitos. Após a ativação do complemento, o C3b se deposita nas superfícies celulares, permitindo a detecção por citometria de fluxo nos tipos celulares relevantes.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 1498–1663 do C3 humano, uma região dentro do domínio C-terminal C345C envolvida na ligação a C5 e na formação da convertase. Este projeto pode favorecer a detecção do C3 de comprimento total e da cadeia α' do C3b.
• Por ser um anticorpo conjugado com PE, ele está pronto para uso direto em citometria de fluxo, sem necessidade de reagentes secundários. Para um sinal ideal, titule o anticorpo (ex: 0,5–5 µg por 10^6 células) e inclua controles de isotipo apropriados.
• Como o C3 é uma proteína secretada, considere a fixação e permeabilização se for necessária a coloração intracelular de células produtoras de C3 (ex: hepatócitos, adipócitos). Para a detecção superficial de depósitos de C3b em células alvo, não é necessária permeabilização.
• Valide o ensaio no seu sistema de amostra específico, como sangue total humano, células mononucleadas de sangue periférico (PBMCs) ou populações de células purificadas, e confirme que a reatividade cruzada está restrita ao C3 humano, conforme indicado.

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