Anticorpo Monoclonal PE de Coelho contra FGFR3 Humano para Citometria de Fluxo - P22607

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FGFR3

• FGFR3 é um receptor tirosina quinase de superfície celular para fatores de crescimento de fibroblasto, controlando proliferação, diferenciação e apoptose.
• É essencial para a diferenciação de condrócitos e o desenvolvimento esquelético adequado; mutações de ganho de função causam acondroplasia e nanismos relacionados.
• A ligação do ligante desencadeia autofosforilação e ativa a sinalização downstream via FRS2, levando às vias RAS-MAPK e AKT; a fosforilação de PLCG1 também ocorre.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, incluindo uma isoforma secretada 3 que se liga aos FGFs e pode antagonizar a sinalização.
• O receptor de comprimento completo localiza-se principalmente na membrana celular, com pools adicionais em vesículas citoplasmáticas e no retículo endoplasmático; a isoforma secretada é extracelular.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, pontes dissulfeto que estabilizam seus domínios semelhantes a imunoglobulinas e fosforilação como parte da ativação da quinase; a ubiquitinação regula a degradação do receptor.
• Alta expressão é observada em cérebro, rim e testículo, enquanto a expressão é baixa em baço, coração e músculo; tecidos fetais apresentam níveis elevados em rim, pulmão, intestino e cérebro.
• Doenças: Mutações ativadoras de FGFR3 estão ligadas a displasias esqueléticas, craniosinostose e surdez; a superexpressão ou ativação constitutiva é observada no câncer de bexiga, mieloma múltiplo e outras malignidades.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (a.a. 23-375), sugerindo que o anticorpo reconhece um epítopo na superfície celular, compatível com citometria de fluxo de células vivas.
• Para FC, use linhas de células humanas positivas para FGFR3 (ex.: carcinoma de bexiga RT4) e inclua controles de isotipo adequados; titule o anticorpo para determinar a concentração de coloração ótima.
• Avalie a reatividade cruzada com outros membros da família FGFR se for fazer multiplexação; confirme a especificidade com validação por knockout ou knockdown no seu sistema.
• A fixação e permeabilização podem permitir a detecção de pools de receptor intracelular, mas podem alterar a acessibilidade do epítopo; avalie os protocolos de fixação com cuidado.
• Esteja ciente de múltiplas isoformas; selecione linhas celulares de referência validadas ou controles de proteína recombinante para verificar o reconhecimento de isoformas, se necessário.

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