Anticorpo Monoclonal Coelho anti-Humano HIF-1 alfa PE para FC (intra) - Q16665

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da HIF-1 alfa

• A HIF-1 alfa funciona como um regulador transcricional mestre da resposta adaptativa à hipóxia, ativando mais de 40 genes, incluindo eritropoietina, VEGF, enzimas glicolíticas e transportadores de glicose, para aumentar a entrega de oxigênio e facilitar a adaptação metabólica. Referências relacionadas: PMID:11292861 PMID:11566883 PMID:15465032
• Ela forma um heterodímero com a ARNT, e o complexo se liga ao elemento de resposta à hipóxia (HRE) nos promotores dos genes alvo. A ativação transcricional requer o recrutamento de coativadores como CREBBP e EP300. Referências relacionadas: PMID:16543236 PMID:9887100
• A atividade da HIF-1 alfa é aumentada pela interação com os coativadores NCOA1 e NCOA2, e o regulador redox APEX1 potencializa ainda mais a ativação. Referências relacionadas: PMID:10594042 PMID:10202154
• Desempenha um papel essencial na vascularização embrionária, angiogênese tumoral e na fisiopatologia da doença isquêmica. Referências relacionadas: PMID:22009797
• Envolvida na distribuição axonal e no transporte de mitocôndrias em neurônios durante a hipóxia. Referências relacionadas: PMID:19528298
• Após infecção por SARS-CoV-2, a HIF-1 alfa é necessária para a indução da glicólise em monócitos, promovendo um estado pró-inflamatório e aumentando a replicação viral. Referências relacionadas: PMID:32697943
• Localiza-se no citoplasma, núcleo e speckles nucleares, dependendo dos níveis de oxigênio.
• Expressa na maioria dos tecidos, com níveis mais altos no rim e coração; frequentemente superexpressa em cânceres humanos devido à hipóxia intratumoral.
• Passa por extensas modificações pós-traducionais, incluindo hidroxilação, acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que regulam sua estabilidade e atividade. Sujeita a splicing alternativo, produzindo isoformas com atividades distintas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo interno (aa 401-500); garanta a permeabilização para coloração intracelular em citometria de fluxo.
• Valide o desempenho do anticorpo em linhagens celulares humanas relevantes sob condições hipóxicas versus normóxicas para confirmar a expressão induzível por hipóxia.
• Titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para FC (intra), a fim de minimizar o fundo e maximizar o sinal.
• Use controles de isotipo apropriados e controles de compensação ao realizar citometria de fluxo multicolor.
• Considere testar em células com knockout ou knockdown de HIF-1 alfa como controle de especificidade.

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