Anticorpo monoclonal de coelho anti-IL-10RA/CD210 humano conjugado com PE para citometria de fluxo - Q13651

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IL-10RA/CD210

• A subunidade alfa do receptor da interleucina-10 (IL-10RA), também denominada CD210, CDw210a, IL-10R1 ou IL10R, é a subunidade de ligação ao ligante do complexo do receptor da IL-10, um receptor de citocina de classe II.
• A IL-10RA liga-se à citocina anti-inflamatória IL-10 e, após a ligação, induz uma alteração conformacional na IL-10RB, permitindo a formação de um complexo receptor heterotetramérico constituído por duas subunidades IL-10RA e duas subunidades IL-10RB. Referências relacionadas: PMID:16982608
• Essa montagem desencadeia a ativação das quinases constitutivamente associadas JAK1 (via IL-10RA) e TYK2 (via IL-10RB), levando à fosforilação de resíduos específicos de tirosina no domínio intracelular da IL-10RA e ao recrutamento e ativação subsequentes da STAT3. Referências relacionadas: PMID:12133952
• A STAT3 ativada forma homodímeros e é translocada para o núcleo, onde promove a expressão de genes-alvo anti-inflamatórios, limitando assim os danos teciduais durante as respostas inflamatórias.
• A sinalização da STAT3 via IL-10RA também suprime a autofagia induzida pela privação de nutrientes, destacando seu papel na regulação metabólica. Referências relacionadas: PMID:26962683
• A IL-10RA é uma glicoproteína transmembranar; contém um peptídeo-sinal, uma única hélice transmembranar e um domínio intracelular com múltiplos sítios de fosforilação e ubiquitinação, além de ligações dissulfeto conservadas.
• A proteína localiza-se principalmente na membrana celular e também é detectada no citoplasma.
• A expressão tecidual está restrita às linhagens hematopoiéticas, incluindo células B, células T, células NK, monócitos e macrófagos; está ausente em células não hematopoiéticas, como fibroblastos e células endoteliais.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido contra uma proteína de fusão recombinante que abrange o domínio extracelular (aminoácidos 22-235) da IL-10RA humana; prevê-se que reconheça o receptor nativo na superfície celular.
• Como anticorpo monoclonal conjugado com PE, foi desenvolvido para citometria de fluxo direta; considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu sistema celular específico.
• Inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio dos receptores Fc para minimizar a ligação inespecífica ao analisar células hematopoiéticas primárias.
• A IL-10RA é expressa constitutivamente em células B, células T, células NK, monócitos e macrófagos; portanto, PBMCs humanas ou linhagens de células imunes podem servir como amostras de controle positivo.
• Valide a marcação de superfície comparando-a com perfis de expressão conhecidos; observe que a IL-10RA não é expressa em células não hematopoiéticas, como fibroblastos.

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