Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano Integrina alfa 3/CD49c conjugado com PE para Citometria de Fluxo - P26006

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Integrina alfa-3

• A integrina alfa-3 (UniProt: P26006, também conhecida como CD49c, cadeia alfa VLA-3, GAPB3) é uma glicoproteína transmembranar que heterodimeriza com a integrina beta-1 para formar o recetor alfa-3/beta-1. A subunidade alfa contém um grande domínio extracelular com sete repetições FG-GAP, uma hélice transmembranar e uma cauda citoplasmática curta.
• O ITGA3/ITGB1 serve como um recetor de adesão versátil para múltiplos ligantes da matriz extracelular, incluindo fibronectina, laminina, colagénio, epiligrina, trombospondina e CSPG4, mediando interações célula-matriz críticas para a organização tecidual.
• Nas membranas plasmáticas dos invadopódios, a integrina alfa-3/beta-1 fornece um local de ancoragem dependente de colagénio para a proteína de ativação dos fibroblastos (FAP/seprase), facilitando a adesão, a formação de invadopódios e a degradação da matriz para promover a invasão celular.
• Nas células endoteliais, o alfa-3/beta-1 pode cooperar com o LGALS3 para medir a migração celular desencadeada pelo CSPG4, ligando o recetor a processos angiogénicos e de cicatrização de feridas.
• (Infecção microbiana) O ITGA3:ITGB1 pode atuar como um recetor celular para o Rhizopus delemar CotH7 em células epiteliais alveolares, representando um potencial passo inicial na patogénese da mucormicose pulmonar.
• A proteína localiza-se predominantemente na membrana celular e está enriquecida em projeções celulares como invadopódios e filopódios, consistente com os seus papéis na adesão e motilidade.
• Duas isoformas principais são produzidas por splicing alternativo: a isoforma 1 é amplamente expressa, enquanto a isoforma 2 é detetada principalmente no cérebro e no coração. No cérebro, ambas as isoformas estão restritas às células musculares lisas vasculares; no coração, a isoforma 1 é encontrada nas células musculares lisas vasculares e a isoforma 2 nas células das veias endoteliais.
• A integrina alfa-3 sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo N-glicosilação, palmitoilação, fosforilação e clivagem em resíduos básicos, todas as quais podem regular o tráfego do recetor, a afinidade e a sinalização. As mutações no ITGA3 estão ligadas à epidermólise bolhosa juncional com doença pulmonar intersticial e síndrome nefrótica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como um anticorpo monoclonal conjugado com PE, este reagente é adequado para citometria de fluxo de imunofluorescência direta em células humanas vivas ou fixadas. Valide a concentração de trabalho ideal por titulação (por exemplo, 0,1–1 µg por milhão de células) no sistema de amostra relevante.
• O imunogénio abrange os aminoácidos 466–620 da integrina alfa-3 humana (dentro do domínio extracelular), uma região conservada em ambas as isoformas. Confirme a reatividade com células primárias expressando a isoforma 2 ou linhas transfectadas, se necessário.
• Para a coloração de superfície, colha as células sem tripsina, se possível, pois a tripsina pode clivar as integrinas de superfície; considere o uso de reagentes de dissociação não enzimáticos. Inclua controlos de isótipo apropriados e controlos de fluorescência menos um (FMO).
• Dado o envolvimento do recetor na adesão celular, as alterações conformacionais dependentes da ativação podem afetar a acessibilidade do epítopo; teste em condições de repouso e estimuladas, se aplicável.

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