Anticorpo Monoclonal PE de Coelho contra Histona H2AX-S139 Fosforilada Humana para Citometria de Fluxo - P16104

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2AX

• A histona H2AX é uma variante da histona H2A que substitui a H2A convencional em um subconjunto de nucleossomos.
• Ela desempenha um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica, compactando o DNA em cromatina.
• A H2AX é crítica para a resposta a danos no DNA; após quebras de dupla fita, ela é rapidamente fosforilada na Serina 139 (γ-H2AX), formando focos que recrutam proteínas de reparo.
• Ela é necessária para a parada do ciclo celular mediada por checkpoint em resposta a baixas doses de radiação ionizante.
• A localização subcelular é nuclear, especificamente nos cromossomos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam sua função no reparo do DNA e na dinâmica da cromatina.
• Também pode desempenhar papéis na meiose e nas interações hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o anticorpo tem como alvo um sítio de fosforilação, considere incluir inibidores de fosfatase durante a preparação celular e a coloração.
• Para citometria de fluxo intracelular, buffers adequados de fixação e permeabilização devem ser otimizados para preservar o epítopo fosforilado.
• A conjugação com PE permite detecção direta; evite o uso de anticorpos secundários conjugados com PE.
• Valide o anticorpo em amostras de controle positivo e negativo relevantes, como células irradiadas versus células não tratadas.
• Realize a titulação do anticorpo para determinar a concentração de coloração ideal para a sua configuração experimental específica.

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