Anticorpo Monoclonal de Coelho PE anti-Humano Siglec-8 para FC - Q9NYZ4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Siglec-8

• Siglec-8, também conhecida como SAF-2 (membro 2 da família sialoadhesina), é uma glicoproteína transmembrana tipo I de passagem única pertencente à superfamília das imunoglobulinas. O splicing alternativo gera múltiplos isoformas.
• Siglec-8 media a adesão dependente de ácido siálico às células sanguíneas, ligando-se preferencialmente ao ácido siálico ligado em α-2,3 com alguma afinidade por ligações α-2,6; interações cis na mesma superfície celular podem mascarar o sítio de ligação ao ligante. Referências relacionadas: PMID:10625619, PMID:10856141
• Reconhece especificamente o ácido N-acetilneuramínico terminal (ácido siálico) e a galactose 6-O-sulfatada subjacente, com uma forte preferência por epítopos de glicano sialil-Lewis X galactose-6-sulfatado. Referências relacionadas: PMID:27357658
• A proteína é expressa predominantemente na superfície de eosinófilos, basófilos e mastócitos, tornando-a um marcador específico para esses tipos celulares em estudos hematopoiéticos.
• A localização subcelular é principalmente na membrana plasmática, consistente com seu papel nas interações e sinalização célula-célula.
• Siglec-8 contém domínios semelhantes a imunoglobulinas e ligações dissulfeto, típicos de moléculas de adesão, e é modificada pós-traducionalmente por glicosilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 17-363), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece epítopos expostos na superfície, tornando-o adequado para citometria de fluxo em células vivas e não permeabilizadas.
• Para aplicações de citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo conjugado a PE para determinar a concentração ideal de coloração usando linhagens celulares relevantes ou células primárias conhecidas por expressar Siglec-8 (por exemplo, populações de eosinófilos, basófilos ou mastócitos).
• Inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio de receptores Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Valide a especificidade da coloração no sistema de amostra pretendido, considerando a expressão relatada de Siglec-8 em basófilos, eosinófilos e mastócitos humanos.
• Observe que existem múltiplos isoformas proteicos (44, 46, 54 kDa), mas o conjugado PE é projetado para detecção de superfície celular e não distinguirá variantes de peso molecular.

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