Anticorpo monoclonal de coelho anti-STAT3 humano conjugado com PE para citometria de fluxo intracelular - P40763

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do STAT3

• STAT3 (transdutor de sinal e ativador da transcrição 3), também conhecido como fator de resposta de fase aguda (APRF), é um fator de transcrição citoplasmático que medeia as respostas celulares às interleucinas, KITLG/SCF, LEP e outros fatores de crescimento (PubMed:10688651, PubMed:11294841, PubMed:12359225). Referências relacionadas: PMID:10688651 PMID:11294841 PMID:12359225

• Após a ativação, o STAT3 recruta coativadores transcricionais, como NCOA1 e MED1, para os promotores dos genes-alvo, modulando a expressão gênica (PubMed:15653507, PubMed:16285960, PubMed:17344214). Referências relacionadas: PMID:15653507 PMID:16285960 PMID:17344214

• O STAT3 regula a diferenciação de células T CD4+ naïve em subpopulações Th17 ou Treg, sendo que a acetilação aumenta sua atividade transcricional, enquanto a desacetilação/oxidação por LOXL3 a suprime (PubMed:28065600, PubMed:28262505). Referências relacionadas: PMID:28065600 PMID:28262505

• O STAT3 promove a progressão do ciclo celular da fase G1 para a fase S ao induzir a expressão de CCND1 (PubMed:17344214) e pode transativar o gene de sobrevivência BIRC5 sob sinalização da leptina (LEP) (PubMed:18242580). Referências relacionadas: PMID:17344214 PMID:18242580

• O STAT3 citoplasmático reprime a macroautofagia por meio da inibição da atividade de EIF2AK2/PKR (PubMed:23084476). Referências relacionadas: PMID:23084476

• O STAT3 é amplamente expresso no coração, cérebro, placenta, pulmões, fígado, músculo esquelético, rins e pâncreas, bem como em células T CD4+ naïve e células T auxiliares Th17, Th1 e Th2 (PubMed:31899195). Ele circula entre o citoplasma e o núcleo. Referências relacionadas: PMID:31899195

• O STAT3 está envolvido na sinalização mediada pela oncostatina-M por meio dos complexos receptores do tipo I (LIFR-IL6ST) e do tipo II (OSMR-IL6ST) (PubMed:9188471). Referências relacionadas: PMID:9188471

• Pode mediar as respostas celulares aos FGFR1, FGFR2, FGFR3 e FGFR4 ativados (PubMed:12873986) e é ativado pela IL31 por meio de IL31RA (PubMed:15194700). Referências relacionadas: PMID:12873986 PMID:15194700

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para a citometria de fluxo intracelular, certifique-se de utilizar protocolos adequados de fixação e permeabilização para permitir o acesso do anticorpo ao STAT3 citoplasmático e nuclear.
• O imunógeno tem como alvo a região C-terminal (aa 611–710); este anticorpo detecta o STAT3 total. Para a detecção específica do estado de ativação, por exemplo, fosfo-STAT3, utilize anticorpos específicos para fosforilação em paralelo ou empregue uma estimulação adequada com citocinas, como IL-6, antes da coloração.
• A conjugação com PE proporciona uma fluorescência intensa; lembre-se de incluir controles de compensação adequados e referências de coloração simples em experimentos multicoloridos.
• A reatividade cruzada foi validada para humanos; se for utilizado com outras espécies, valide empiricamente a especificidade com controles apropriados, como amostras de knockout/knockdown.
• A concentração ideal de trabalho deve ser determinada por titulação no sistema experimental; a concentração inicial sugerida para FC é de 0,5–5 µg/mL.

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