Anticorpo Monoclonal Coelho PE anti-TNF-α Humano para FC (intracelular) - P01375

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator de Necrose Tumoral

• O fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), codificado pelo gene TNF no cromossomo 6 humano, é uma citocina pró-inflamatória chave e membro da superfamília de ligantes TNF (TNFSF2).
• Ele é produzido como uma proteína transmembranar do tipo II e liberado como um homotrímero solúvel após clivagem, principalmente por macrófagos ativados.
• O TNF-α se liga a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, desencadeando vias de sinalização que podem levar à apoptose, necroptose ou ativação de genes pró-inflamatórios.
• É um pirógeno potente e indutor de caquexia e, sob certas condições, pode estimular a proliferação e diferenciação celular.
• O TNF-α promove a osteoclastogênese e a reabsorção óssea, contribuindo para a perda óssea em doenças inflamatórias.
• Promove a angiogênese ao induzir sinergicamente a produção de VEGF com IL1B e IL6. Referências relacionadas: PMID:12794819
• Na artrite reumatoide, o TNF-α prejudica a função das células T reguladoras por meio da desfosforilação de FOXP3, através da regulação positiva da PP1. Referências relacionadas: PMID:23396208
• Atua como mediador chave da morte celular na ação anticancerígena de neutrófilos estimulados por BCG combinados com mimetizadores DIABLO/SMAC em células de câncer de bexiga. Referências relacionadas: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• A forma do domínio intracelular (ICD) do TNF-α pode induzir a produção de IL-12 em células dendríticas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular solúvel (aa 77-233) do TNF-α humano, o que sugere o reconhecimento tanto do precursor ligado à membrana quanto da forma madura secretada.
• Para citometria de fluxo intracelular, otimize os protocolos de fixação e permeabilização celular para garantir a detecção precisa do TNF-α citoplasmático, já que a proteína é principalmente secretada.
• Inclua controles de isotipo adequados e controles não estimulados para distinguir a coloração específica do fundo, especialmente em células imunológicas ativadas.
• Valide o desempenho do anticorpo no seu tipo celular específico e nas condições de ativação, pois os níveis de expressão do TNF-α podem variar.

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