Anticorpo Monoclonal de Coelho PE anti-CD14 Humano/Macaco para Citometria de Fluxo - P08571

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD14

• O CD14, também conhecido como antígeno de diferenciação de monócitos, antígeno My23 ou glicoproteína rica em leucina específica de células mieloides, é um ator-chave na imunidade inata.
• Atua como um correceptor para lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano, ligando-se ao LPS monomérico em conjunto com a LBP e entregando-o ao complexo LY96/TLR4, mediando assim a resposta imune inata ao LPS bacteriano. Referências relacionadas: PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• A sinalização a jusante ocorre via MyD88, TIRAP e TRAF6, levando à ativação do NF-kappa-B, secreção de citocinas e resposta inflamatória. Referências relacionadas: PMID:8612135
• O CD14 também funciona como um correceptor para heterodímeros TLR2:TLR6 e TLR2:TLR1 em resposta a lipopeptídeos diacilados e triacilados; esses aglomerados desencadeiam sinalização na superfície celular e subsequente tráfego dependente de lipid rafts para o Golgi. Referências relacionadas: PMID:16880211
• Além disso, o CD14 liga-se à LDL eletronegativa (LDL(-)) e medeia a liberação de citocinas induzida por LDL(-), ligando a imunidade inata ao metabolismo lipídico. Referências relacionadas: PMID:23880187
• Subcelularmente, o CD14 está localizado na membrana celular, em jangadas de membrana (membrane rafts) e no aparelho de Golgi, e também é encontrado como uma proteína secretada. É uma glicoproteína rica em repetições de leucina (LRR) com uma âncora GPI.
• Especificidade tecidual: O CD14 é expresso fortemente na superfície de monócitos e fracamente em granulócitos; é detectado em macrófagos e na maioria dos macrófagos teciduais. Referências relacionadas: PMID:1698311

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende o domínio extracelular (aminoácidos 20–352) do CD14 humano, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece a conformação nativa do receptor. Valide a marcação em seu sistema de amostra relevante usando controles positivos e negativos apropriados.
• Para citometria de fluxo, faça titulação do anticorpo conjugado a PE para determinar a concentração de trabalho ideal para seu tipo celular de interesse. Use um controle de isotipo para avaliar a ligação inespecífica.
• A reatividade cruzada com o CD14 de macaco cinomolgo foi demonstrada; se usar outras espécies, verifique a reatividade de forma independente.
• Evite exposição prolongada à luz ao trabalhar com o conjugado PE para manter a integridade do sinal.

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