Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Humano/Macaco CD16 para FC - P08637/O75015

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD16

• O CD16, também conhecido como FCGR3, existe em duas isoformas: FCGR3A (CD16a) e FCGR3B (CD16b), codificadas por genes distintos (FCGR3A e FCGR3B) que compartilham alta homologia de sequência e mediam a ligação ao fragmento Fc da IgG. Referências relacionadas: PMID:11711607 PMID:21768335 PMID:22023369

• O CD16a, expresso em células NK e monócitos, desencadeia a citotoxicidade celular dependente de anticorpo (ADCC) ao se ligar a complexos antígeno-IgG agrupados, levando à lise da célula alvo e à produção de citocinas, um processo fundamental para a imunidade antiviral e antitumoral. Referências relacionadas: PMID:24412922 PMID:25786175 PMID:29967280 PMID:9916693

• A sinalização via CD16a envolve a fosforilação de adaptadores contendo ITAM, ativando as vias PI3K e de fluxo de cálcio; isso leva tanto à degranulação quanto à produção de citocinas pró-inflamatórias, com resultados de sinalização distintos dependendo do status de fosforilação do receptor. Referências relacionadas: PMID:1825220 PMID:23024279 PMID:2532305

• O CD16a desempenha um papel fundamental no mecanismo de ação de anticorpos monoclonais terapêuticos, potencializando a ADCC contra células tumorais; as IgGs afucosiladas apresentam maior afinidade pelo CD16a, resultando em funções efetoras mais potentes. Referências relacionadas: PMID:27670158 PMID:34485821 PMID:28566370

• Durante a infecção secundária pelo vírus da Dengue, o CD16a pode mediar o aumento da dependência de anticorpos (ADE) facilitando a entrada viral em células mieloides por meio de imunocomplexos de IgG1 afucosilada e vírus, exacerbando a patogênese.

• O CD16a é uma glicoproteína transmembrana localizada predominantemente na membrana celular de células NK e de um subconjunto de monócitos circulantes; também é gerada uma forma solúvel secretada, que contribui para suas diversas funções.

• A proteína é caracterizada por domínios do tipo imunoglobulina, pontes dissulfeto e glicosilação N-ligada, que são essenciais para sua integridade estrutural e ligação ao ligante; a fosforilação modula ainda mais sua capacidade de sinalização.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, realize a titulação do anticorpo conjugado com PE para determinar a concentração ideal para o seu tipo celular específico e condições experimentais, usando PBMCs humanas ou amostras de macaco cynomolgus como controles positivos.
• Inclua controles de isótipo adequados e etapas de bloqueio de Fc para minimizar a ligação não específica, especialmente ao analisar células que expressam receptores Fc.
• O fluoróforo PE é brilhante e adequado para detecção de alvos de baixa abundância; considere sua compatibilidade com outros fluoróforos ao projetar painéis multicoloridos e garanta a compensação correta.
• Valide o desempenho do anticorpo na sua aplicação pretendida, como ensaios repórter de ADCC ou perfil de células imunes, usando réplicas biológicas relevantes e estados de ativação adequados.
• Este anticorpo também pode ser aplicado para o estudo de isoformas de CD16 em ensaios funcionais; a reatividade cruzada com cynomolgus suporta modelos de pesquisa translacional.

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