Anticorpo Monoclonal PE de Coelho contra HLA-DR Humano/Macaco para Citometria de Fluxo - P01903

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HLA-DR

• O gene HLA-DRA codifica a cadeia alfa da molécula HLA-DR do MHC de classe II. Ele forma um heterodímero com a cadeia beta para apresentar peptídeos antigênicos em APCs profissionais às células T CD4+, orientando as funções efetoras das células T auxiliares.
  Referências relacionadas:
  PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368

• Ele tipicamente apresenta peptídeos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos gerados a partir de antígenos endocitados em lisossomos, com um resíduo de âncora hidrofóbico grande essencial na posição 1 do peptídeo para a ligação ao MHCII.
  Referências relacionadas:
  PMID:8145819

• No microambiente tumoral, o HLA-DR apresenta peptídeos de APCs residentes no tumor via fagocitose de células tumorais apoptóticas ou macropinocitose de proteínas secretadas.
  Referências relacionadas:
  PMID:31495665

• Ele também apresenta autopepídeos intracelulares via macroautofagia, fundamental para a seleção de células T tímicas e a tolerância central.
  Referências relacionadas:
  PMID:17182262, PMID:23783831

• A seleção de epítopos imunodominantes envolve dois modos de processamento: 'ligar primeiro, cortar/aparar depois' para peptídeos estranhos e 'cortar primeiro, ligar depois' para autopepídeos.
  Referências relacionadas:
  PMID:25413013

• Subcelularmente, o HLA-DR se localiza na membrana celular, retículo endoplasmático, endossomas precoces/tardios, lisossomos e autofagolisossomos.

• Em nível proteico, é expresso em APCs profissionais (macrófagos, células dendríticas, células B) e células epiteliais tímicas.
  Referências relacionadas:
  PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665

• As modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto e glicosilação N-ligada; é uma glicoproteína transmembrana de passagem única.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, este anticorpo conjugado com PE pode ser usado para coloração por imunofluorescência direta de células vivas que expressam HLA-DR. Titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para a sua amostra e instrumento específicos.
• O imunógeno é a proteína HLA-DR humana recombinante de comprimento total, o que sugere que o anticorpo provavelmente reconhece a conformação nativa na superfície celular. A reatividade cruzada com macaco Cynomolgus está confirmada; portanto, pode ser aplicado em estudos imunológicos de primatas não humanos.
• Valide a coloração com controles de isotipo adequados e corantes de viabilidade no seu sistema experimental. Considere etapas de bloqueio para reduzir a ligação não específica, se necessário.
• Para obter os melhores resultados, mantenha as amostras resfriadas e analise-as imediatamente após a coloração para manter a integridade do antígeno de superfície.

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