mAb de coelho anti-IgM humano/macaco conjugado a PE para FC - P01871

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IgM

• IGHM codifica a região constante da cadeia pesada mu da imunoglobulina (IgM), que existe como receptor de células B (BCR) ligado à membrana e como anticorpo secretado.
• A IgM ligada à membrana funciona como um BCR, reconhecendo antígenos específicos e desencadeando a ativação das células B e a expansão clonal PMID:20176268 PMID:22158414.
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• Os domínios variáveis são montados por meio da recombinação V(D)J e sofrem hipermutação somática, possibilitando a maturação da afinidade após a exposição ao antígeno PMID:17576170 PMID:20176268.
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• A IgM secretada (sIgM) multimeriza-se principalmente em pentâmeros, conferindo alta avidez na ligação ao antígeno; as sIgM naturais são polirreativas, enquanto as sIgM imunes são específicas para antígenos PMID:32029689 PMID:37095205.
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• A sIgM medeia funções efetoras ao se ligar ao receptor Fc FCMR em células linfoides e recrutar C1q para ativar a via clássica do complemento, promovendo a neutralização de patógenos e a eliminação de células apoptóticas PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186.
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• Na imunidade mucosal, a sIgM é transportada através das barreiras epiteliais pelo PIGR e pode sofrer retrotranscitose mediada por FCMR para a entrega de antígenos aos tecidos linfoides mucosais PMID:32029689.
  Referências relacionadas:
• Subcelularmente, a IgM é tanto secretada quanto ancorada na membrana celular, em concordância com seu papel duplo na imunidade humoral.
• As principais modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de pontes dissulfeto, essenciais para sua estrutura e multimerização.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo monoclonal conjugado a PE foi desenvolvido para citometria de fluxo (FC). Titule o anticorpo no sistema de amostra relevante para determinar a concentração ideal de marcação.
• O imunógeno corresponde à região constante Fc (aminoácidos 218-453 de P01871), sugerindo o reconhecimento tanto da IgM solúvel quanto da IgM de membrana. Verifique a reatividade nas condições do seu ensaio.
• Utilize controles de isotipo apropriados e bloqueio de Fc para minimizar a ligação inespecífica, especialmente ao analisar células B ou amostras com alta expressão de receptores Fc.
• Como a IgM pode formar multímeros de alto peso molecular, certifique-se de que a preparação da amostra evite a agregação e utilize tampões preparados recentemente.
• Foi demonstrada reatividade cruzada com humanos e cinomolgos; para outras espécies, valide experimentalmente a ligação.

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