Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Humano/Macaco Ki67 para Citometria de Fluxo Intracelular - P46013

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ki67

• Ki67 é uma grande proteína nuclear codificada pelo gene MKI67, amplamente utilizada como marcador de proliferação celular.
• Ele se associa à superfície dos cromossomos mitóticos, atuando como um repelente cromossômico para manter a dispersão individual dos cromossomos durante a mitose precoce.
  Referências relacionadas: PMID:27362226, PMID:32879492, PMID:35513709
• Durante a mitose precoce, o Ki67 forma estruturas estendidas em forma de escova que fornecem uma barreira estérica e eletrostática para evitar o colapso dos cromossomos.
  Referências relacionadas: PMID:27362226
• Na anáfase, a desfosforilação desencadeia uma mudança funcional: o Ki67 se torna um atrativo cromossômico, promovendo a aglutinação dos cromossomos por meio de separação líquido-líquido dependente de RNA.
  Referências relacionadas: PMID:28935370, PMID:39153474
• O Ki67 se liga ao DNA, com preferência por DNA superenrolado e DNA rico em AT, e pode contribuir para a organização da cromatina.
  Referências relacionadas: PMID:10878551, PMID:24867636
• Ele se localiza no núcleo e nucléolo durante a interfase, e cobre a superfície dos cromossomos durante a mitose.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam suas funções mitóticas.
• Como produto do gene MKI67, a expressão do Ki67 está fortemente ligada à progressão do ciclo celular e está ausente em células quiescentes.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o Ki67 é um antígeno nuclear, a citometria de fluxo intracelular requer fixação e permeabilização eficazes; otimize as etapas de permeabilização para o seu tipo celular.
• O anticorpo é produzido contra um peptídeo sintético na região C-terminal (aa 2271-2370); certifique-se que este epítopo está presente na sua célula ou tecido alvo.
• Utilize controles de isotipo adequados e configurações de compensação para anticorpos conjugados com PE durante a citometria de fluxo.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com macaco cynomolgus; valide em amostras de primatas não humanos relevantes se utilizado em pesquisa translacional.
• Para estudos de proliferação, considere a coloração combinada com corantes de conteúdo de DNA (ex: DAPI, Hoechst) ou outros marcadores do ciclo celular para distinguir as fases do ciclo celular.

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