Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-IL-9 de Rato para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P15247

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IL-9

• A Interleucina-9 (IL-9), também conhecida como citocina P40 e fator de crescimento de células T P40, é uma citocina multifuncional codificada pelo gene Il9 em ratos (UniProt P15247).
• A IL-9 é secretada principalmente por linfócitos T auxiliares 2 (Th2), mastócitos e células NKT, e desempenha papéis críticos nas respostas imunológicas contra parasitas, bem como na inflamação alérgica. Referências relacionadas: PMID:11070175, PMID:19433802
• Ela modula a permeabilidade epitelial intestinal e contribui para a imunidade adaptativa, especialmente nos tecidos mucosos. Referências relacionadas: PMID:12704113
• A IL-9 promove a diferenciação de células T auxiliares produtoras de IL-17 (TH17) e estimula a proliferação e diferenciação de mastócitos, ligando-a a vias inflamatórias e alérgicas. Referências relacionadas: PMID:11070175, PMID:19433802
• Mecanisticamente, a IL-9 sinaliza através de um receptor composto pela cadeia alfa do receptor de IL-9 e pela cadeia gama comum (IL2RG), levando à ativação das quinases JAK1 e JAK3 e dos fatores de transcrição STAT1, STAT3 e STAT5 a jusante. O STAT1 impulsiona principalmente genes de diferenciação, enquanto o STAT3 e o STAT5 medeiam efeitos antiapoptóticos. Referências relacionadas: PMID:2145361, PMID:7718508, PMID:10464327
• A proteína IL-9 madura é uma glicoproteína secretada com um peso molecular previsto de aproximadamente 16 kDa (UniProt: 16075 Da) e contém características estruturais típicas da família das citocinas de feixe de quatro hélices.
• A localização subcelular é extracelular após a clivagem do peptídeo sinal; ela funciona como um mediador solúvel no meio extracelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 19–114 da IL-9 de rato (NP_032399.1), que abrange a proteína secretada madura sem o peptídeo sinal. Este design provavelmente gera anticorpos que reconhecem a forma nativa e processada da IL-9.
• Como anticorpo monoclonal conjugado com PE, ele está otimizado para citometria de fluxo intracelular (CF intracelular). Para detecção de IL-9 intracelular, as células devem ser fixadas e permeabilizadas com um protocolo adequado antes da coloração. Uma etapa de estimulação (por exemplo, com PMA/ionomicina na presença de um inibidor de transporte de proteínas) pode ser necessária para acumular a citocina intracelular em certos tipos de células.
• Como o anticorpo é relatado para reagir com IL-9 de rato, a reatividade cruzada com humano ou outras espécies não foi avaliada; recomenda-se validar a especificidade no sistema de amostra pretendido.
• A origem monoclonal de coelho pode oferecer alta afinidade e especificidade; no entanto, a titulação é aconselhável para determinar a concentração ideal para cada condição experimental.
• Note que o anticorpo é enviado com bolsas de gelo; após o recebimento, armazene conforme recomendado (geralmente a 2–8°C no escuro para anticorpos conjugados) para manter a estabilidade.

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