Anticorpo Monoclonal PE Coelho anti-Mouse S100A9 para Citometria de Fluxo Intracelular - P31725

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da S100A9

• S100A9 é uma proteína ligante de cálcio e zinco que desempenha um papel fundamental na regulação de processos inflamatórios e da resposta imune, incluindo quimiotaxia de neutrófilos, fagocitose e degranulação.
  Referências relacionadas: PMID:15331440, PMID:17767165, PMID:18403730
• Intracelularmente, a S100A9 facilita o tráfego e o metabolismo do ácido araquidônico em leucócitos, modula o citoesqueleto dependente de tubulina durante a migração de fagócitos e ativa a NADPH-oxidase neutrofílica.
  Referências relacionadas: PMID:15331440
• Extracelularmente, a S100A9 exerce atividades pró-inflamatórias, antimicrobianas, sequestradoras de oxidantes e indutoras de apoptose.
  Referências relacionadas: PMID:21382888
• A S100A9 atua como uma alarmina ou padrão molecular associado a dano (DAMP), estimulando células imunes inatas por ligação ao receptor Toll-like 4 (TLR4) e ao receptor de produtos finais de glicação avançada (AGER).
  Referências relacionadas: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• A ligação ao TLR4 e ao AGER ativa as vias de sinalização MAP-quinase e NF-kappa-B, amplificando a cascata pró-inflamatória.
  Referências relacionadas: PMID:17767165, PMID:18403730, PMID:19402754
• Existe principalmente como heterodímero de calprotectina (S100A8/S100A9), que integra funções imunes intracelulares e extracelulares.
• Apresenta atividade antimicrobiana contra bactérias e fungos, provavelmente por quelação de Zn²⁺ essencial para o crescimento microbiano.
• A S100A9 é predominantemente secretada, mas também pode ser encontrada no citoplasma, associada ao citoesqueleto e na membrana celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que cobre a sequência completa da S100a9 de camundongo (resíduos 1–113); portanto, espera-se que o anticorpo reconheça a S100A9 nativa em citometria de fluxo intracelular. Para uma coloração ótima, realize fixação e permeabilização adequadas para proteínas nucleares/citoplasmáticas e titule o anticorpo conjugado com PE para determinar a melhor relação sinal-ruído.
• A S100A9 é altamente expressa em células da linhagem mieloide (neutrófilos, monócitos, macrófagos). Use controles positivos relevantes, como medula óssea de camundongo ou esplenócitos, e inclua controles de isotipo e bloqueio de Fc para minimizar a ligação não específica.
• Para citometria de fluxo intracelular, confirme a especificidade do anticorpo usando células knockout para S100A9 ou bloqueio com o imunógeno recombinante, se disponível.
• Por se tratar de um anticorpo primário conjugado com PE, ele permite detecção direta em uma única etapa, reduzindo o ruído de fundo de anticorpos secundários e simplificando painéis multicoloridos.

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