Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Mouse TNF-α Conjugado com PE para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P06804

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TNF-α

• Identidade da proteína: O fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), também conhecido como caquectina ou TNFSF2, é uma potente citocina pró-inflamatória.
• Função principal: Liga-se a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, mediando diversas respostas celulares, incluindo apoptose, proliferação celular e diferenciação.
• Papel imunológico: Secretado principalmente por macrófagos; atua como um pirógeno endógeno causando febre diretamente ou através da indução de interleucina-1 e contribui para a caquexia na inflamação crônica.
• Efeitos metabólicos: Induz resistência à insulina inibindo a fosforilação de tirosina do IRS1 induzida por insulina e a captação de glicose em adipócitos, parcialmente através da degradação da proteína GKAP42. Referências relacionadas: PMID:25586176
• Remodelação óssea: Promove a osteoclastogênese, mediando assim a reabsorção óssea. Referências relacionadas: PMID:32741026
• Angiogênese: Desempenha um papel na angiogênese induzindo sinergicamente a produção de VEGF com IL-1β e IL-6.
• Função da isoforma: A forma do domínio intracelular (ICD) do fator de necrose tumoral induz a produção de IL-12 em células dendríticas.
• Localização subcelular: Existe como um precursor ancorado à membrana (proteína transmembrana do tipo II) e uma forma solúvel secretada após clivagem proteolítica.
• Modificações pós-traducionais: As características incluem glicosilação N-ligada, uma ligação dissulfeto, lipidação (miristoilação) e fosforilação; estas regulam o tráfego e a atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho conjugado com PE é projetado para citometria de fluxo intracelular (FC). A permeabilização das células é necessária para detectar TNF-α intracelular.
• Considere usar o imunógeno de proteína recombinante (aa 80-235) como um controle positivo ou agente bloqueador para confirmar a especificidade.
• Como o TNF-α é amplamente secretado, a estimulação com LPS ou PMA/ionomicina na presença de um inibidor de transporte de proteínas (por exemplo, brefeldina A) pode aumentar a coloração intracelular em macrófagos ou células T.
• Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante (por exemplo, esplenócitos de camundongo ou linhagens celulares de macrófagos) e inclua controles de isotipo apropriados.
• Proteja o conjugado de PE da luz e evite ciclos de congelação-descongelação para manter a intensidade da fluorescência.

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