Anticorpo monoclonal PE rato anti-mouse CD3 para citometria de fluxo - P04235 / P22646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD3

• O CD3 é um complexo de múltiplas cadeias composto pelas cadeias delta, epsilon, gama e zeta; este anticorpo reage com as cadeias delta e epsilon do CD3 (SWISS: P04235/P22646) que se associam ao receptor de célula T (TCR) para formar o complexo TCR-CD3 nos linfócitos T.
• O complexo TCR-CD3 é essencial para a imunidade adaptativa, transduzindo sinais das células apresentadoras de antígeno após o reconhecimento do antígeno pelo TCR por meio de motivos de ativação baseados em tirosina dos imunorreceptores (ITAMs) nos domínios citoplasmáticos das cadeias do CD3.
• O CD3 delta (P04235) desempenha um papel crítico na diferenciação dos timócitos; na ausência de um complexo TCR-CD3 funcional, os timócitos não conseguem se diferenciar corretamente, destacando sua importância no desenvolvimento de células T. Referências relacionadas: PMID:10935641
• As cadeias do CD3 interagem com os coreceptores CD4 e CD8, estabelecendo uma ligação funcional necessária para a ativação e seleção positiva de células T CD4+ ou CD8+.
• A localização subcelular está confinada à membrana celular, onde o CD3 funciona como um complexo receptor de membrana integral.
• As principais modificações pós-traducionais incluem a fosforilação dos ITAMs pelas quinases da família Src LCK e FYN, além de glicosilação e formação de pontes dissulfeto, que são essenciais para a transdução de sinais e a integridade estrutural.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é fornecido como conjugado com PE, permitindo coloração direta em uma única etapa para citometria de fluxo; recomenda-se a realização de experimentos de titulação para determinar a concentração ideal para o seu tipo específico de amostra.
• Valide o anticorpo em populações de linfócitos de camundongo (ex.: esplenócitos, timócitos) e use controles de isotipo apropriados para confirmar a especificidade.
• Como o imunógeno é um peptídeo sintético derivado do CD3 de camundongo, o epítopo pode ser linear e estável; no entanto, corantes de viabilidade fixáveis ou outras combinações de fluoróforos devem ser testados para painéis multicoloridos.
• Considere protocolos de coloração de superfície e evite a permeabilização, a menos que o epítopo esteja preservado, pois a fixação/permeabilização pode afetar alguns epítopos.

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