Anticorpo Monoclonal PE/Cyanina5 de camundongo anti-CD3 humano para Citometria de Fluxo - P07766

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CD3 epsilon

• O gene CD3E codifica a cadeia epsilon da CD3, uma subunidade central do complexo receptor de linfócito T (TCR)-CD3, que é essencial para a imunidade adaptativa ao transduzir sinais de ativação após o reconhecimento do antígeno. Referências relacionadas: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• Os motivos de ativação baseados em tirosina no domínio intracelular (ITAMs) da CD3E são fosforilados pelas quinases LCK e FYN após o contato do TCR, criando sítios de ligação para a ZAP70 e iniciando cascatas de sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:2470098 PMID:40592325
• CD3E contribui para o desenvolvimento correto de linfócitos T e a seleção de timócitos, garantindo a formação adequada do repertório imunológico.
• O domínio citoplasmático da CD3E contém motivos de endocitose que medeiam a internalização e a regulação negativa do complexo TCR-CD3, modulando a responsividade dos linfócitos T após a estimulação. Referências relacionadas: PMID:10384095 PMID:26507128
• Como receptor para ITPRIPL1, a CD3E pode inibir a ativação de linfócitos T ao recrutar a NCK1, que impede a ligação da ZAP70 e bloqueia a sinalização ERK-NFkB e o influxo de cálcio. Referências relacionadas: PMID:12110186 PMID:38614099
• CD3E é uma proteína de membrana tipo I de passagem única, com um domínio extracelular semelhante à imunoglobulina, uma hélice transmembranar e uma cauda citoplasmática; ela se localiza exclusivamente na membrana plasmática.
• As modificações pós-traducionais incluem a fosforilação dos ITAMs e uma ponte dissulfeto conservada que estabiliza sua estrutura extracelular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo, produzido contra a proteína CD3 humana recombinante, está validado para citometria de fluxo; para outras aplicações, recomendamos a realização de experimentos piloto para confirmar a reatividade no seu sistema de amostras.
• Ao montar painéis de citometria de fluxo multicolor, inclua controles de compensação adequados e realize a titulação do anticorpo para determinar a concentração de coloração ótima.
• Como conjugado de corante tandem, o PE/Cyanina5 é sensível à luz e a fixadores; minimize a exposição à luz, utilize tampões de coloração gelados e evite fixação prolongada para preservar a intensidade do sinal.
• Para coloração intracelular ou detecção de CD3 fosforilado, valide as condições de permeabilização, pois tratamentos rigorosos podem alterar a acessibilidade do epítopo ou a estabilidade do corante.

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