Anticorpo Monoclonal Anti-Mouse Ly-6A/E (Sca-1) PE/Cianina7 para Citometria de Fluxo - P05533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Antígeno Linfocitário 6A-2/6E-1 (Sca-1)

• O antígeno linfocitário 6A-2/6E-1, comumente conhecido como antígeno de células-tronco 1 (Sca-1) ou proteína ativadora de células T (TAP), é codificado pelo gene Ly6a em camundongos e pertence à superfamília Ly-6/uPAR de proteínas ancoradas por glicosilfosfatidilinositol (GPI).
• O Sca-1 é um marcador bem estabelecido de células-tronco hematopoiéticas e células progenitoras murinas, sendo amplamente expresso em múltiplos tecidos.
• A função principal do Sca-1 está ligada à ativação de células T, onde pode modular a sinalização após o engajamento, contribuindo para a regulação da resposta imune.
• O Sca-1 está ancorado à folha externa da membrana plasmática por uma porção GPI, sem domínio transmembrana ou citoplasmático, dependendo da associação com rafts lipídicos para a transdução de sinal.
• Como uma glicoproteína ancorada por GPI, o Sca-1 sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação N-ligada e a adição da âncora GPI, que são críticas para sua localização na membrana e função.
• A proteína contém ligações dissulfeto conservadas que estabilizam sua dobra de três dedos característica da família Ly-6, facilitando interações proteína-proteína.
• O peso molecular observado do Sca-1 frequentemente excede sua massa calculada (14,4 kDa) devido à glicosilação extensiva, com detecção típica em torno de 115 kDa em SDS-PAGE em condições redutoras.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando um imunógeno recombinante que abrange o domínio extracelular (aminoácidos 27-111) do Sca-1 de camundongo, visando a conformação nativa para reconhecimento superior em citometria de fluxo.
• Para aplicações de citometria de fluxo, considere titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal e inclua controles de isotipo apropriados e etapas de bloqueio de receptores Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Note que o conjugado PE/Cianina7 é sensível à luz e a ciclos de congelamento-descongelamento; proteja sempre da luz e evite congelamentos repetidos.
• Valide a especificidade do anticorpo na linhagem de camundongos ou linhagem celular relevante, pois existem variações alélicas (por exemplo, Ly-6A.2 vs Ly-6E.1); o imunógeno corresponde ao alelo Ly-6A.2.
• A expressão de Sca-1 pode ser regulada positivamente após a ativação em células T; experimentos de curso de tempo podem ser necessários para capturar mudanças dinâmicas de expressão.

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