Anticorpo Monoclonal PE/Cianina7 Coelho anti-Humano CD33 para Citometria de Fluxo - P20138

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD33

• CD33 (Siglec-3) é uma lectina do tipo imunoglobulina que se liga a ácido siálico, mediando interações célula-célula e ajudando a manter as células imunes em estado de repouso. Referências relacionadas: PMID:10611343, PMID:11320212, PMID:15597323
• Ele se liga preferencialmente a glicanos com ácido siálico ligados em alfa-2,3 e alfa-2,6 em glicoproteínas e glicolipídios. Referências relacionadas: PMID:7718872
• Após o contato com ligantes (por exemplo, C1q ou glicoproteínas sialiladas), os motivos ITIM citoplasmáticos são fosforilados por quinases do tipo Src como LCK, criando sítios de ancoragem para as fosfatases PTPN6/SHP-1 e PTPN11/SHP-2. Referências relacionadas: PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798
• Essas fosfatases desfosforilam moléculas de sinalização a jusante, levando a efeitos inibitórios; uma via repressiva em monócitos requer PI3K. Referências relacionadas: PMID:10206955, PMID:10887109, PMID:15597323
• O CD33 se localiza na membrana celular e nos peroxissomos, e é expresso principalmente em células da linhagem monocytic/mieloide e microglia cerebral (o splicing alternativo produz múltiplas isoformas).
• A proteína é uma glicoproteína de membrana tipo I de passagem única com um domínio extracelular do tipo V semelhante a Ig, vários motivos ITIM intracelulares, e é modificada por pontes dissulfeto e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 18–259, que inclui o domínio extracelular de ligação ao ácido siálico, portanto o anticorpo tende a reconhecer o CD33 nativo na superfície celular — ideal para citometria de fluxo (CF).
• Para uma coloração por CF ideal, titule o anticorpo no sistema de células mieloides/monocíticas humanas relevante para determinar a diluição de trabalho adequada.
• Inclua controles de isotipo adequados e corantes de viabilidade no seu painel de CF, e proteja o anticorpo conjugado com PE/Cianina7 da luz, pois o fluoróforo é fotossensível.

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