Anticorpo Monoclonal PE/Cianina7 Coelho anti-Humano IFN-gama para Citometria de Fluxo Intracelular - P01579

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Interferon gama

• O Interferon gama (IFN-γ) é um interferon do tipo II predominantemente secretado por linfócitos T ativados e células natural killer (NK), atuando como uma citocina pleiotrópica chave na regulação imunológica.
• Ele exerce respostas antimicrobianas, antivirais e antitumorais cruciais ao ativar células imunes efetoras e aumentar a apresentação de antígenos.
  Referências relacionadas:
  PMID:16914093
  PMID:8666937
• Ao se ligar ao seu receptor IFNGR1, o IFN-γ desencadeia a cascata de sinalização JAK-STAT, levando à ativação da STAT1, translocação nuclear e transcrição de genes regulados pelo IFN-γ, incluindo fatores de transcrição como o IRF1.
  Referências relacionadas:
  PMID:8349687
  PMID:16914093
• O IFN-γ aumenta a apresentação de antígenos MHC de classe I ao induzir a substituição das subunidades constitutivas do proteassoma por subunidades do imunoproteassoma, e ao up-regular o ativador PA28, aumentando assim a quantidade, qualidade e repertório de peptídeos para carregamento no MHC de classe I.
  Referências relacionadas:
  PMID:8666937
  PMID:8163024
  PMID:11112687
• Ele também up-regula os complexos MHC de classe II na superfície celular ao promover a expressão de moléculas chave como as catepsinas B, H e L, otimizando ainda mais a apresentação de antígenos.
  Referências relacionadas:
  PMID:7729559
• Participa da regulação do desenvolvimento, quiescência e diferenciação de células-tronco hematopoiéticas em condições homeostáticas. (Por similaridade)
• O IFN-γ é uma glicoproteína secretada com massa molecular calculada de aproximadamente 19,3 kDa; ele é caracterizado por um peptídeo sinal, glicosilação e um local de clivagem em um par de resíduos básicos (Palavras-chave UniProt).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo intracelular, estabeleça condições adequadas de fixação e permeabilização celular para permitir a detecção de IFN-γ em células T ou NK ativadas; estimulantes comuns incluem PMA/ionomicina na presença de um inibidor de transporte de proteínas.
• O imunógeno (aa 24–166) corresponde à forma secretada madura do IFN-γ humano; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça a citocina acumulada intracelularmente, tornando-o adequado para ensaios funcionais de citocinas.
• Inclua controles de compensação adequados ao usar o conjugado PE/Cianina7 em painéis multicoloridos, e considere o uso de um canal de exclusão ou corante de viabilidade para excluir células mortas.
• Valide a especificidade da coloração em amostras de controle positivo e negativo relevantes, como células mononucleares de sangue periférico humano estimuladas versus não estimuladas, para confirmar a detecção do IFN-γ endógeno.

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