mAb de Coelho anti-PD-L1/CD274 Humano conjugado com PE/Cyanine7 para Citometria de Fluxo - Q9NZQ7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PD-L1/CD274

• O PD-L1 (Ligante 1 de morte celular programada 1), também conhecido como B7-H1, é uma proteína transmembrana do tipo I e membro da família B7 de ligantes reguladores imunes.
• Atua como um ligante para o receptor inibitório PD-1 (PDCD1), desempenhando um papel crítico na manutenção da tolerância imunológica ao modular os limiares de ativação das células T e limitar as respostas efetoras. Referências relacionadas: PMID:11015443 PMID:28813410 PMID:28813417
• Pode também coestimular subconjuntos de células T que produzem IL-10 através de um receptor ativador não identificado. Referências relacionadas: PMID:10581077
• Em tumores, a interação PD-1/PD-L1 inibe a função efetora dos linfócitos T citotóxicos (CTL), contribuindo para a evasão imune; o bloqueio desta via pode reverter a exaustão das células T e normalizar as respostas antitumorais. Referências relacionadas: PMID:28813410 PMID:28813417
• Em resposta à hipóxia, o PD-L1 transloca-se para o núcleo e atua como um coativador de transcrição para promover a transcrição de GSDMC, levando à piroptose. Referências relacionadas: PMID:32929201
• A localização subcelular inclui a membrana celular, membranas de endossomos precoces e de reciclagem, núcleo, e também pode ser secretado.
• Amplamente expresso em tecidos, com níveis elevados no coração, músculo esquelético, placenta e pulmão; também presente em células T ativadas, células B, células dendríticas, queratinócitos e monócitos.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, pontes dissulfeto e ubiquitinação; a proteína apresenta domínios semelhantes a imunoglobulinas e uma hélice transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 1–290 do PD-L1 humano, contendo o domínio extracelular; este design suporta o reconhecimento da conformação nativa em células vivas.
• Para citometria de fluxo, considere o uso de reagentes de bloqueio de receptores Fc e controles de isotipo apropriados para minimizar a ligação inespecífica.
• Otimize a titulação do anticorpo para o seu tipo de célula e instrumento; as concentrações iniciais típicas variam de 0,5–5 µg/mL.
• Valide o anticorpo em seu sistema de amostra relevante, como células imunes ativadas ou linhagens celulares tumorais, e inclua corantes de viabilidade para excluir células mortas.
• Devido à internalização e reciclagem do PD-L1, o manuseio suave das células e tempos de incubação curtos a 4°C podem ajudar a preservar a marcação de superfície.

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