Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD48 de camundongo PE/Cyanine7 (Citometria de fluxo) - P18181

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD48

• CD48 (também conhecido como BCM1, BLAST-1, SLAMF2, sgp-60) é uma glicoproteína de superfície celular ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI), pertencente à família das moléculas de ativação linfocítica sinalizadora (SLAM).
• Ele medeia a ativação e a regulação das células imunes ao interagir com receptores de superfície celular, como 2B4/CD244 e CD2, por meio de seu domínio de imunoglobulina N-terminal. Referências relacionadas: PMID:21278219, PMID:9881969
• Nas células T, o CD48 associa-se ao CD2 para recrutar a quinase Src LCK e o adaptador LAT ao complexo TCR/CD3, aumentando a fosforilação da LCK e a sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:9881969
• O envolvimento do CD244 pelo CD48 induz a fosforilação dos ITSMs no CD244, levando à formação da sinapse imunológica e à secreção direcionada de grânulos líticos (perforina, granzimas) por linfócitos T citotóxicos e células NK. Referências relacionadas: PMID:21278219, PMID:9881969
• Subcelularmente, o CD48 é encontrado na membrana celular, enriquecido em balsas lipídicas da membrana, e também pode ser secretado na forma solúvel.
• As palavras-chave do UniProt incluem âncora GPI, domínio de imunoglobulina, ligação dissulfeto, glicoproteína e lipoproteína, refletindo suas características estruturais e sua associação com a membrana.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 23-216 do CD48 de camundongo) corresponde ao domínio extracelular predito; portanto, é provável que o anticorpo reconheça o antígeno de superfície nativo. Para citometria de fluxo, faça uma titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração usando uma linhagem celular relevante ou células primárias (por exemplo, esplenócitos ou timócitos de camundongo).
• Como o CD48 é uma proteína ancorada por GPI, a coloração da superfície de células vivas geralmente é realizada sem permeabilização. Inclua controles de isotipo apropriados e controles de fluorescência menos um (FMO) para confirmar a especificidade.
• PE/Cyanine7 é um corante tandem; proteja-o da exposição prolongada à luz para evitar o fotobranqueamento. A fixação pode alterar a fluorescência do corante tandem; portanto, verifique a compatibilidade caso seja necessária a coloração intracelular.
• O CD48 é expresso em todas as células hematopoiéticas, exceto nos eritrócitos; use controles positivos conhecidos (por exemplo, EL4, YAC-1) e controles negativos para validar os padrões de coloração.

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