Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD8a de camundongo conjugado a PE/Cyanine7 para FC - P01731

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de CD8a

• CD8a (cadeia alfa da glicoproteína de superfície de células T CD8), também conhecida como Lyt-2, é uma glicoproteína integral de membrana essencial para a imunidade adaptativa.
• Funciona como correceptor para moléculas do MHC de classe I nas células apresentadoras de antígenos, permitindo que as células T CD8+ reconheçam complexos peptídeo-MHC I e iniciem respostas citotóxicas contra células infectadas ou tumorais.
• Após o engajamento do TCR, CD8a recruta a quinase Src LCK para o complexo TCR-CD3, desencadeando cascatas de fosforilação que levam à produção de linfocinas, adesão e ativação de CTLs.
• Nas células NK, os homodímeros de CD8a promovem a sobrevivência e a destruição sequencial de células-alvo, facilitando a conjugação e a lise.
• A sinalização de CD8a promove a diferenciação de linfócitos ativados em células T CD8+ de memória, sustentando a imunidade de longo prazo.
• A proteína está localizada exclusivamente na membrana celular como uma proteína de membrana do tipo I de passagem única, com um domínio extracelular de imunoglobulina, uma hélice transmembrana e uma curta cauda citoplasmática.
• As modificações pós-traducionais incluem a formação de pontes dissulfeto, glicosilação ligada a N e palmitoilação, que podem influenciar a organização da membrana e a sinalização.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, embora a isoforma de comprimento completo seja predominante nas células T.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 28–196) de CD8a de camundongo, evitando as regiões transmembrana e citoplasmática; espera-se que esse desenho produza anticorpos que reconheçam a conformação nativa da superfície celular.
• Este conjugado PE/Cyanine7 é validado para citometria de fluxo; assegure uma titulação adequada (por exemplo, 0,25–1 µg por 10^6 células) e inclua controles de isotipo ao analisar linfócitos de camundongo.
• Como CD8a é coexpresso com o TCR, considere a cop marcação com anti-CD3 para distinguir as células T CD8+ das células NK, que também podem expressar homodímeros de CD8a.
• Valide a especificidade em linhagens de camundongo deficientes em CD8a ou por bloqueio com anti-CD8a não conjugado para confirmar a ligação.
• Evite a exposição prolongada à luz para preservar a estabilidade do fluoróforo; utilize em até 24 horas após a reconstituição, se diluído.

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