Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD45 humano/macaco conjugado com PerCP para citometria de fluxo - P08575

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do CD45 (proteína tirosina-fosfatase C do tipo receptor)

• Funciona como uma proteína tirosina-fosfatase necessária para a ativação das células T por meio do receptor de antígeno, conforme demonstrado por estudos genéticos. Regula positivamente a coativação das células T ao se ligar à DPP4 e desfosforila efetores a jusante, incluindo SKAP1, FYN e LYN. Referências relacionadas: PMID:35767951
• Atua como receptor para a proteína UL11 do citomegalovírus humano (HCMV), mediando a ligação da UL11 às células T. Essa interação atenua a sinalização do receptor de células T, reduzindo a fosforilação de tirosina e prejudicando a proliferação das células T.
• Está localizado principalmente na membrana celular, com enriquecimento em microdomínios de membrana e na sinapse imunológica, facilitando seu papel na transdução de sinais.
• Múltiplas isoformas surgem do splicing alternativo de PTPRC. As isoformas 1, 2, 3, 5 e 7 são detectadas em timócitos, enquanto as isoformas 4, 6 e 8 estão ausentes, indicando padrões de expressão específicos de isoformas rigidamente regulados.
• O CD45 é uma proteína transmembrana do tipo I, de passagem única e altamente glicosilada, com peso molecular previsto de aproximadamente 147 kDa, embora as isoformas detectadas variem de 131 a 147 kDa. Contém dois domínios intracelulares de fosfatase e pertence à família das proteínas tirosina-fosfatases.
• Classificado com palavras-chave que incluem splicing alternativo, glicoproteína, fosfoproteína, sinapse, interação hospedeiro-vírus e variante associada à doença SCID, refletindo seus múltiplos papéis.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde aos aminoácidos 26-577 do CD45 humano, abrangendo uma grande região extracelular. Esse desenho favorece a detecção do CD45 expresso na superfície de células vivas e não fixadas, tornando-o especialmente adequado para aplicações de citometria de fluxo.
• Como conjugado de PerCP, considere a sobreposição espectral com PE, PE-Cy5 e corantes tandem em painéis multicoloridos. Utilize controles de compensação apropriados e faça a titulação do anticorpo para obter uma relação sinal/ruído ideal.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com o CD45 de macaco-cinomolgo; valide os padrões de coloração utilizando controles positivos relevantes (por exemplo, PBMCs humanas e linfócitos sanguíneos de macaco-cinomolgo) e negativos (por exemplo, linhagens celulares negativas para CD45).
• Para estudos de células T, observe que a expressão das isoformas varia entre os subconjuntos de células T e os estágios de diferenciação. Combine o anticorpo com marcadores específicos de linhagem para delimitar corretamente as populações.

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