mAb PerCP de Coelho anti-Humano/Macaco CD8a - P01732

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD8a

• CD8a (glicoproteína de superfície da cadeia alfa do CD8 de células T) é uma glicoproteína transmembranar codificada pelo gene CD8A (ID do gene: 925). Também é conhecida como T8/Leu-2 e p32.
• Atua como coreceptor para moléculas MHC de classe I em células apresentadoras de antígeno, interagindo simultaneamente com o receptor de célula T (TCR) para recrutar a quinase Src LCK, iniciando a sinalização intracelular que leva à ativação de linfócitos T citotóxicos, produção de citocinas, motilidade e adesão.
• Desempenha um papel crítico na imunidade adaptativa ao permitir que linfócitos T citotóxicos reconheçam e eliminem células infectadas e células tumorais.
• Em células NK (natural killer), homodímeros de CD8A fornecem um mecanismo de sobrevivência que permite a conjugação e lise de múltiplas células alvo, além de promover a sobrevivência e diferenciação de linfócitos ativados em células T CD8 de memória.
• O CD8 é tipicamente um heterodímero ligado por dissulfeto das cadeias alfa (CD8A) e beta (CD8B) em células T derivadas do timo, mas também pode ser expresso como homodímero de CD8A em subconjuntos de células NK, células T de memória, linfócitos intraepiteliais, monócitos e células dendríticas.
• A localização subcelular inclui a membrana celular e formas secretadas; é uma lipoproteína com uma hélice transmembranar e sofre modificações pós-traducionais como glicosilação, formação de ligações dissulfeto e palmitoileração.
• Pertence à superfamília das imunoglobulinas, contendo um domínio de imunoglobulina. O splicing alternativo produz múltiplas isoformas.
• É expresso em células dendríticas plasmocitóides após estimulação pelo vírus do herpes simplex tipo 1, indicando um papel nas respostas antivirais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 22-182) cobre o domínio extracelular da CD8A, o que é previsto para gerar anticorpos que reconhecem a proteína nativa da superfície celular. Para citometria de fluxo, considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo celular específico e protocolo de coloração.
• Como este anticorpo é conjugado ao PerCP, certifique-se de que seu citômetro de fluxo está equipado com conjuntos adequados de laser e filtro (tipicamente excitação de 488 nm, emissão de 675 nm). O PerCP é suscetível ao fotobranqueamento; manuseie as amostras coradas no escuro e evite exposição prolongada à luz.
• A reatividade cruzada foi validada para humano e macaco cynomolgus. Se utilizar outras espécies, verifique a homologia de sequência da região do imunógeno para prever possível reatividade cruzada e valide experimentalmente.
• Para coloração intracelular, uma etapa de permeabilização pode ser necessária. Inclua controles de isotipo adequados para distinguir a coloração específica.

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