Anticorpo Monoclonal PerCP/Cyanina5.5 Coelho anti-Humano/Macaco CD45 para Citometria de Fluxo - P08575

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD45

• CD45, também conhecido como antígeno comum de leucócitos (L-CA) ou T200, é uma tirosina-protein fosfatase do tipo receptor codificada pelo gene PTPRC. Múltiplas isoformas surgem a partir do splicing alternativo, com pesos moleculares variando de aproximadamente 131 a 147 kDa.
• CD45 é essencial para a ativação de linfócitos T através do receptor de antígeno, atuando como regulador positivo da coativação ao se ligar a DPP4. Ele recruta e desfosforila SKAP1 e FYN, e modula a atividade de LYN (PubMed:35767951). Referências relacionadas: PMID:35767951
• Ele funciona como uma proteína tirosina fosfatase, com o primeiro domínio PTPase exibindo atividade enzimática e o segundo domínio influenciando a especificidade do substrato.
• CD45 interage com CLEC10A no contato entre célula apresentadora de antígeno e célula T, onde CLEC10A em células dendríticas imaturas reconhece CD45 carregador de antígeno Tn em linfócitos T efetores, modulando o limiar de ativação de linfócitos T para limitar a auto-reatividade.
• Durante a infecção por citomegalovírus, CD45 atua como receptor para a proteína viral UL11, mediando a ligação às células T e levando a redução da fosforilação de tirosina de proteínas de sinalização e prejuízo na proliferação de células T.
• Ele se localiza na membrana celular, nas microdomínios de membrana e na sinapse imunológica, o que é consistente com seu papel na sinalização.
• CD45 é uma glicoproteína e fosfoproteína, com papéis chave na interação hospedeiro-vírus, e mutações estão associadas à SCID (imunodeficiência combinada grave).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que compreende os aminoácidos 26-577 do CD45 humano (P08575). Este domínio extracelular é comumente direcionado para aplicações de citometria de fluxo; leve isso em consideração ao projetar seu painel de coloração.
• Para citometria de fluxo, realize a titulação do anticorpo para determinar a concentração ótima de coloração. Inclua controles de isotipo adequados e corantes de viabilidade. Como o CD45 é expresso em todas as células hematopoiéticas, é aconselhado o uso de estratégias cuidadosas de gate para distinguir subconjuntos de leucócitos.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com CD45 humano e cynomolgus (Macaco cynomolgus). Ao trabalhar com amostras de cynomolgus, valide o padrão de coloração no sistema de amostra relevante para confirmar a reatividade e a especificidade.
• Existem múltiplas isoformas de CD45 (131-147 kDa), e o anticorpo pode reconhecer várias isoformas dependendo da localização do epítopo. Se for necessária detecção específica de isoforma, confira o reconhecimento por western blot ou análise antigênica.

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