Anticorpo Monoclonal PerCP/Cyanina5.5 de Coelho anti-Humano/Macaco PD-1/CD279 para Citometria de Fluxo - Q15116

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PD-1

• A proteína 1 de morte programada (PD-1, CD279) é um receptor inibitório expresso em linfócitos T ativados por antígenos que desempenha um papel crítico na indução e manutenção da tolerância imunológica ao próprio organismo. Referências relacionadas: PMID:21276005 PMID:31754127 PMID:32184441

• O PD-1 envia sinais inibitórios ao se ligar aos seus ligantes PD-L1 (CD274) e PD-L2 (CD273), levando à atenuação da sinalização do receptor de antígeno T (TCR) e à supressão da ativação de linfócitos T. Referências relacionadas: PMID:21276005 PMID:26602187

• Após a ligação com o ligante, o PD-1 é fosforilado em seu motivo ITSM, recrutando a tirosina fosfatase SHP-2 (PTPN11), que desfosforila moléculas sinalizadoras proximais chave do TCR como ZAP70, PKCθ e CD3ζ, inibindo diretamente a ativação de linfócitos T. Referências relacionadas: PMID:32184441

• Os tumores exploram o eixo inibitório PD-1/PD-L1 para escapar da vigilância imunológica; a interação com o PD-L1 nas células tumorais inibe as funções efetoras dos linfócitos T citotóxicos (CTL), promovendo a fuga imunológica. Referências relacionadas: PMID:28951311

• O bloqueio da via PD-1 reverte a exaustão de linfócitos T, restaura a imunidade antitumoral e fornece a base mecanicista para a terapia com inibidores de pontos de verificação imunológica em oncologia. Referências relacionadas: PMID:22658127 PMID:25034862 PMID:25399552

• O PD-1 é uma glicoproteína transmembrana tipo I localizada na membrana celular, pertencente à superfamília das imunoglobulinas.

• A proteína sofre modificações pós-traducionais incluindo fosforilação, glicosilação N-ligada e ubiquitinação, que modulam sua expressão e atividade de sinalização.

• Sua cauda intracelular contém um motivo ITSM essencial para o recrutamento de SHP-2, enquanto a região extracelular compreende um domínio tipo V de imunoglobulina responsável pela interação com o ligante.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu tipo de célula e condições experimentais. Inclua controles de isotipo adequados e reagentes de bloqueio de receptor Fc para minimizar a ligação não específica.
• Valide a expressão de PD-1 em linfócitos T humanos ativados ou em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de macaco cynomolgus como sistema de controle positivo.
• Use células isoladas recentemente sempre que possível e evite estimulação prolongada que pode reduzir a expressão de PD-1, para garantir uma coloração confiável.
• Prepare suspensões de células únicas e filtre antes da aquisição para evitar entupimentos e garantir dados de alta qualidade. Realize a exclusão de células mortas para melhorar a especificidade.
• Para painéis multicoloridos, confirme a compatibilidade dos fluorocromos e as configurações de compensação, pois o PerCP/Cyanina5.5 tem sobreposição espectral com outros corantes vermelhos.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Integral

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