PerCP/Cyanine5.5 Coelho anti-Mouse CD4 Anticorpo Monoclonal para Citometria de Fluxo - P06332

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD4

• O alvo é o CD4 de camundongo (glicoproteína de superfície de células T CD4), também conhecido como L3T4 ou Ly-4. Duas isoformas geradas por splicing alternativo foram relatadas, sendo a isoforma 1 a sequência canônica (UniProt P06332).
• O CD4 é uma glicoproteína de membrana integral que funciona como um correceptor para moléculas do complexo principal de histocompatibilidade de classe II (MHC II) em células T, reconhecendo peptídeos derivados de proteínas extracelulares e, assim, desempenhando um papel essencial na imunidade adaptativa.
• Ao interagir com complexos de MHC classe II:peptídeo em células apresentadoras de antígenos, o CD4 interage simultaneamente com o receptor de células T (TCR) e recruta a quinase Src LCK para o complexo TCR-CD3, iniciando cascatas de sinalização que promovem a ativação de células T auxiliares, a produção de citocinas e a proliferação.
• Além da sinalização dependente de TCR, o CD4 também contribui para funções independentes de TCR/LCK em macrófagos e células NK, influenciando a diferenciação, ativação, expressão de citocinas e migração celular.
• O CD4 é crítico para o desenvolvimento de células T auxiliares no timo e é capaz de desencadear a diferenciação de monócitos em macrófagos funcionais maduros.
• A proteína é predominantemente expressa na membrana celular das células T auxiliares, que são especializadas na ativação de células T citotóxicas, regulação de células B e ativação de fagócitos. Também é encontrada em outras células imunes, como macrófagos, células dendríticas e células NK.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem glicosilação N-ligada, palmitoilagem, fosforilação e a presença de pontes dissulfeto, que são importantes para sua estabilidade estrutural e função.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo abrange os aminoácidos 27–394 do CD4 de camundongo (NP_038516.1), o que cobre todo o domínio extracelular. Este design favorece o reconhecimento do CD4 nativo expresso na superfície.
• Este anticorpo é validado para citometria de fluxo (FC) e é fornecido como um conjugado de PerCP/Cyanine5.5, permitindo a detecção direta do CD4 de camundongo em células vivas sem a necessidade de um anticorpo secundário.
• Ao configurar experimentos de citometria de fluxo, considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração para o seu tipo de célula e instrumento específicos. Inclua controles de isotipo apropriados e corantes de viabilidade para garantir um gating preciso.
• Como o CD4 é expresso em células T auxiliares e outras populações imunes, verifique o padrão de coloração nos tecidos ou amostras de células de camundongo relevantes (por exemplo, esplenócitos, timócitos, PBMCs) e considere a coloração simultânea com CD3 e CD8 para discriminar subconjuntos de células T.

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