Anticorpo Policlonial PERK de Coelho para IF/ICC, ELISA - Q9NZJ5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PERK

• Identidade proteica e isoformas: PERK (EIF2AK3) também é conhecido como quinase do retículo endoplasmático semelhante a PRKR, quinase pancreática do eIF2-alfa e quinase de tirosina proteica EIF2AK3. Pertence à família das quinases de eIF2α e é o sensor principal do estresse do retículo endoplasmático (RE).
• Quinase da resposta a proteínas não dobradas (UPR): PERK é uma quinase sensora de estresse metabólico que fosforila a subunidade α do fator de iniciação da tradução eucariótico 2 (EIF2S1/eIF-2α) em resposta a proteínas não dobradas e vários estresses celulares.
  Referências relacionadas:
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Ativação por proteínas mal dobradas: Ele reconhece e se liga especificamente a proteínas mal dobradas no RE, o que desencadeia a autofosforilação e ativação, iniciando a resposta integrada ao estresse (ISR).
  Referências relacionadas:
  PMID:10677345, PMID:27917829, PMID:31023583
• Reprogramação da tradução: A fosforilação de eIF2α atenua a síntese proteica global dependente da capa, ao mesmo tempo que promove seletivamente a tradução de mRNAs responsivos ao estresse, incluindo os fatores de transcrição ATF4 e QRICH1, reprogramando assim a expressão gênica.
  Referências relacionadas:
  PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Regulação mitocondrial: A sinalização da UPR mediada por PERK aumenta a fosforilação oxidativa mitocondrial ao regulamentar positivamente a expressão de COX7A2L via ATF4. Nos sítios de contato entre mitocôndrias e RE, a ATAD3A inibe o PERK para proteger as mitocôndrias de uma UPR excessiva.
  Referências relacionadas:
  PMID:31023583, PMID:39116259
• Ativação do NRF2: Além de eIF2α, PERK fosforila NFE2L2/NRF2, causando sua dissociação de KEAP1 e posterior translocação nuclear, que ativa genes antioxidantes e de desintoxicação (Por similaridade).
• Localização subcelular: Membrana do retículo endoplasmático – PERK é uma proteína transmembrana que reside predominantemente no RE.
• Distribuição tecidual: Expressa ubiquitousmente, com níveis particularmente elevados em tecidos secretores, consistente com seu papel de monitorar o ambiente de dobramento do RE.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região entre os aminoácidos 50–600 do PERK humano. Para IF/ICC, são recomendadas condições padrão de permeabilização e fixação adequadas para proteínas residentes no RE. Realize a titulação do anticorpo primário para otimizar a relação sinal-ruído.
• Ao usar para ELISA, considere incluir um peptídeo de bloqueio ou proteína PERK recombinante como controle de especificidade. Valide a reatividade cruzada com amostras de camundongo usando lisados de tecidos com alta atividade secretora.
• Como PERK é uma quinase transmembrana do RE, considere o uso de detergentes suaves durante a extração de proteínas para preservar os epítopos conformacionais se o anticorpo for aplicado em outros imunoensaios além das aplicações validadas.

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