Anticorpo Monoclonal de Coelho PGK1 para WB, ELISA - P00558

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PGK1

• O PGK1 codifica a fosfoglicerato quinase 1, uma enzima glicolítica que catalisa a conversão reversível de 1,3-bisfosfoglicerato em 3-fosfoglicerato, produzindo ATP. Referências relacionadas: PMID:30323285, PMID:7391028
• Além de seu papel citoplasmático, o PGK1 transloca para a matriz mitocondrial, onde funciona como uma proteína quinase, fosforilando o PDK1 para inibir o complexo piruvato desidrogenase, suprimindo a fosforilação oxidativa e promovendo a glicólise. Referências relacionadas: PMID:26942675, PMID:36849569
• O PGK1 atua como um cofator da polimerase alfa (proteína de reconhecimento de iniciador), ligando a glicólise à replicação do DNA. Referências relacionadas: PMID:2324090
• Apresenta ampla especificidade de substrato de nucleotídeos, com capacidade de usar as formas L- e D- de nucleotídeos de purinas e pirimidinas, embora a atividade de pirimidinas seja menor. Referências relacionadas: PMID:18463139
• O PGK1 é expresso principalmente em espermatogônias e localizado na peça principal do espermatozoide, sugerindo um papel na motilidade espermática. Referências relacionadas: PMID:26677959
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; a proteína sofre modificações de acetilação, fosforilação e hidroxilação.
• Variantes associadas a doenças estão ligadas à anemia hemolítica hereditária devido à deficiência de fosfoglicerato quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Com base no design do imunógeno (peptídeo N-terminal), espera-se que este anticorpo reconheça a região N-terminal, o que pode detectar o PGK1 de comprimento total e fragmentos N-terminais. Valide em seu contexto experimental.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é de aproximadamente 45 kDa; no entanto, modificações pós-traducionais podem causar pequenas alterações. Use controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa, HepG2) e valide em amostras de camundongo/rato se a reatividade cruzada for desejada.
• Para ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção que visa um epítopo diferente; otimize as condições de revestimento e os títulos de anticorpo para os requisitos específicos do seu ensaio.
• Dada a localização dupla citoplasmática e mitocondrial do PGK1, a fracionamento subcelular pode ser útil para estudar funções específicas de compartimento.

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